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供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2
貨號(hào)	BFN6072012696	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途	僅供科研

細(xì)胞名稱	人胚肺成纖維細(xì)胞MRC-5
貨物編碼	BFN6072012696
產(chǎn)品規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1	1.5ml凍存管x2
細(xì)胞數(shù)量	1x10^6	1x10^6
保存溫度	27℃	-198℃
運(yùn)輸方式	常溫保溫運(yùn)輸	干冰運(yùn)輸
安全等級(jí)	1
用途限制	僅供科研用途 2類

培養(yǎng)體系	DMEM高糖培養(yǎng)基+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)溫度	37℃	二氧化碳濃度	5%
簡(jiǎn)介	人胚肺成纖維細(xì)胞MRC-5細(xì)胞系來自14周齡男性胎兒的正常肺組織，該細(xì)胞老化前能傳代42~46個(gè)倍增時(shí)間.
注釋	Group: Vaccine production cell line. Biotechnology: Used for the production of the Human Diploid Cell Vaccine (HDCV) against rabies (Trade name: Imovax Rabies). Biotechnology: Used for the production of the Hepatitis A vaccines Avaxim, Epaxal, Havrix and Vaqta. Biotechnology: Used for the production of the live varicella virus vaccine (Trade name: Varivax). Biotechnology: Used for the production of the live zoster vaccine (Trade name: Zostavax). Characteristics: Senesces at 26 PDL (PubMed=17395773). Doubling time: ~34 hours (lot 06022011), ~1.5 days (lot 05202005), ~2 days (lot 05192003), 36 hours (lot 041392), ~5 days (lot 031098), ~38 hours (lot 04212016) (JCRB). Omics: DNA methylation analysis. Omics: Proteome analysis by 2D-DE. Omics: Proteome analysis by 2D-DE/MS. Omics: Transcriptome analysis. Misspelling: MCR-5; Occasionally. Derived from sampling site: Fetal lung.
STR信息	Amelogenin X,Y CSF1PO 11,12 D2S1338 20 D3S1358 15,17 D5S818 11,12 D7S820 10,11 D8S1179 13 D13S317 11,14 D16S539 9,11 D18S51 15,21 D19S433 14,15 D21S11 31.2 FGA 21,23 Penta D 12 Penta E 12,16 TH01 8 TPOX 8 vWA 15
參考文獻(xiàn)	PubMed=10752125 Polianskaia G.G., Efremova T.N., Sakuta G.A. The effect of mycoplasmal contamination of human embryonic lung cell line MRC-5 on the karyotypic variability. Tsitologiia 42:190-195(2000) PubMed=17395773; DOI=10.1634/stemcells.2006-0504 Sudo K., Kanno M., Miharada K., Ogawa S., Hiroyama T., Saijo K., Nakamura Y. Mesenchymal progenitors able to differentiate into osteogenic, chondrogenic, and/or adipogenic cells in vitro are present in most primary fibroblast-like cell populations. Stem Cells 25:1610-1617(2007) PubMed=19657000 Rubporn A., Srisomsap C., Subhasitanont P., Chokchaichamnankit D., Chiablaem K., Svasti J., Sangvanich P. Comparative proteomic analysis of lung cancer cell line and lung fibroblast cell line. Cancer Genomics Proteomics 6:229-237(2009) PubMed=21637780; DOI=10.1371/journal.pgen.1002085 Nishino K., Toyoda M., Yamazaki-Inoue M., Fukawatase Y., Chikazawa E., Sakaguchi H., Akutsu H., Umezawa A. DNA methylation dynamics in human induced pluripotent stem cells over time. PLoS Genet. 7:E1002085-E1002085(2011) PubMed=25903999; DOI=10.1002/biot.201400388 Genzel Y. Designing cell lines for viral vaccine production: where do we stand? Biotechnol. J. 10:728-740(2015) CLPUB00391 Wadman M. The vaccine race: science, politics, and the human costs of defeating disease. (In) ISBN 9780525427537; pp.1-436; Viking; New York (2016)

驗(yàn)收細(xì)胞注意事項(xiàng)

1、收到人胚肺成纖維細(xì)胞MRC-5細(xì)胞，請(qǐng)查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請(qǐng)盡快聯(lián)系。

2、收到人胚肺成纖維細(xì)胞MRC-5細(xì)胞，如包裝完好，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過程中的問題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時(shí)左右，讓細(xì)胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理。

3、收到人胚肺成纖維細(xì)胞MRC-5細(xì)胞后，請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)離心收集細(xì)胞，接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進(jìn)口胎牛血清。剛接到細(xì)胞，若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到 15％去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到 80%左右，血清濃度還是在 10％。

4、收到人胚肺成纖維細(xì)胞MRC-5細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過 80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。

5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時(shí)之需。

6、24 小時(shí)后，細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細(xì)胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn)）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn)，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘?？梢苑?/span>入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁，見細(xì)胞脫落下來，加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細(xì)胞量多可一傳三，有些細(xì)胞不易傳得過稀，有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶，以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。（懸浮細(xì)胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。