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供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2
貨號	BFN60700110	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途	僅供科研

細(xì)胞名稱	人胚腎細(xì)胞HEK-293
貨物編碼	BFN60700110
產(chǎn)品規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1	1.5ml凍存管x2
細(xì)胞數(shù)量	1x10^6	1x10^6
保存溫度	37℃	-198℃
運輸方式	常溫保溫運輸	干冰運輸
安全等級	1
用途限制	僅供科研用途 1類

培養(yǎng)體系	DMEM高糖培養(yǎng)基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone）
培養(yǎng)溫度	37℃	二氧化碳濃度	5%
簡介	人胚腎細(xì)胞HEK-293早期報道中指出該細(xì)胞基因組中含有腺病毒5（Ad5）基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA，但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點的克隆測序發(fā)現(xiàn)，Ad5的1～4344位線性核苷酸整合入細(xì)胞染色體19q13.2。該細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主。可表達(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體，由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。生物安全級別為2級。該細(xì)胞引種自ATCC CRL-1573
注釋	Part of: ENCODE project common cell types; tier 3. Part of: MD Anderson Cell Lines Project. Doubling time: ~30 hours (CLS); ~24-30 hours (DSMZ). Transformant: NCBI_TaxID; 28285; Adenovirus 5. Omics: Cell surface proteome. Omics: Deep antibody staining analysis. Omics: Deep proteome analysis. Omics: Deep RNAseq analysis. Omics: Genome sequenced. Omics: DNA methylation analysis. Omics: H3K4me3 ChIP-seq epigenome analysis. Omics: Metabolome analysis. Omics: Methylated arginine analysis by proteomics. Omics: Myristoylated proteins analysis by proteomics. Omics: Protein expression by reverse-phase protein arrays. Omics: Transcriptome analysis. Omics: Virome analysis using proteomics. Misspelling: HECK293; Occasionally. Misspelling: HEK239; Occasionally.
STR信息	Amelogenin X CSF1PO 11,12 D2S1338 19 D3S1358 15,17 D5S818 8,9 D7S820 11,12 D8S1179 12,14 D13S317 12,14 (ATCC; CCRID; CLS; DSMZ; ECACC; KCLB; PubMed=11416159; PubMed=15218237; RCB) 12 (JCRB; TKG) D16S539 9,13 (ATCC; CCRID; CLS; ECACC; JCRB; RCB; TKG) 9 (DSMZ) D18S51 17,18 (CCRID; PubMed=11416159) 18 (CLS) 17 (PubMed=15218237) D19S433 15,18 (CCRID) 18 (CLS) D21S11 28,30.2 FGA 23 Penta D 9,10 Penta E 7,15 TH01 7,9.3 TPOX 11 vWA 16,19
參考文獻(xiàn)	PubMed=27577262; DOI=10.1126/scisignal.aaf7329 Larsen S.C., Sylvestersen K.B., Mund A., Lyon D., Mullari M., Madsen M.V., Daniel J.A., Jensen L.J., Nielsen M.L. Proteome-wide analysis of arginine monomethylation reveals widespread occurrence in human cells. Sci. Signal. 9:Rs9-Rs9(2016) PubMed=28196595; DOI=10.1016/j.ccell.2017.01.005 Li J., Zhao W., Akbani R., Liu W., Ju Z., Ling S., Vellano C.P., Roebuck P., Yu Q., Eterovic A.K., Byers L.A., Davies M.A., Deng W., Gopal Y.N.V., Chen G., von Euw E.M., Slamon D.J., Conklin D., Heymach J.V., Gazdar A.F., Minna J.D., Myers J.N., Lu Y., Mills G.B., Liang H. Characterization of human cancer cell lines by reverse-phase protein arrays. Cancer Cell 31:225-239(2017) PubMed=29660373; DOI=10.1016/j.bbagen.2018.04.012 Touat-Hamici Z., Bulteau A.-L., Bianga J., Jean-Jacques H., Szpunar J., Lobinski R., Chavatte L. Selenium-regulated hierarchy of human selenoproteome in cancerous and immortalized cells lines. Biochim. Biophys. Acta 1862:2493-2505(2018) PubMed=30260228; DOI=10.1021/acs.jproteome.8b00538 Knott M.E., Manzi M., Zabalegui N., Salazar M.O., Puricelli L.I., Monge M.E. Metabolic footprinting of a clear cell renal cell carcinoma in vitro model for human kidney cancer detection. J. Proteome Res. 17:3877-3888(2018)

驗收細(xì)胞注意事項

1、收到人胚腎細(xì)胞HEK-293細(xì)胞，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯(lián)系。

2、收到人胚腎細(xì)胞HEK-293細(xì)胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運輸過程中的問題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時，請不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時左右，讓細(xì)胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數(shù)細(xì)胞會重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁，請用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺盼藍(lán)染色證實細(xì)胞活力正常請按懸浮細(xì)胞的方法處理。

3、收到人胚腎細(xì)胞HEK-293細(xì)胞后，請鏡下觀察細(xì)胞，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多，請離心收集細(xì)胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進(jìn)口胎牛血清。剛接到細(xì)胞，若細(xì)胞不多時血清濃度可以加到 15％去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到 80%左右，血清濃度還是在 10％。

4、收到人胚腎細(xì)胞HEK-293細(xì)胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過 80%匯合度時，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。

5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時之需。

6、24 小時后，人胚腎細(xì)胞HEK-293細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細(xì)胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細(xì)胞生長面為準(zhǔn)）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時間以具體細(xì)胞為準(zhǔn)，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘?？梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細(xì)胞脫落下來，加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細(xì)胞量多可一傳三，有些細(xì)胞不易傳得過稀，有些生長較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶，以具體細(xì)胞和經(jīng)驗為準(zhǔn)。（懸浮細(xì)胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。

7、貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無菌操作。換液時，換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37℃，5%CO2 培養(yǎng)。

特別提醒：原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用，請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。

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