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        1. 青旗(上海)生物技術(shù)發(fā)展有限公司
          中級(jí)會(huì)員 | 第4年

          4006560232

          人羊膜細(xì)胞WISH

          參  考  價(jià)面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

          產(chǎn)品型號(hào)

          品       牌其他品牌

          廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

          所  在  地上海市

          更新時(shí)間:2021-05-27 10:12:35瀏覽次數(shù):481次

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2
          貨號(hào) BFN60700188 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研
          青旗(上海)生物技術(shù)發(fā)展有限公司,總部位于上海浦東新區(qū),依托本地高校資源,逐步發(fā)展成為以生物技術(shù)為主的研發(fā)、生產(chǎn)、培訓(xùn)為一體的綜合化產(chǎn)業(yè)平臺(tái),在標(biāo)準(zhǔn)化細(xì)胞庫(kù)建立及細(xì)胞藥物前端模型方面成果顯著。公司生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)原代細(xì)胞、細(xì)胞系、ELISA試劑盒、感受態(tài)細(xì)胞和HPLC檢測(cè)等科研產(chǎn)品與服務(wù)。我們秉承對(duì)用戶負(fù)責(zé)的態(tài)度,以對(duì)科研的高度嚴(yán)謹(jǐn),以嚴(yán)格的質(zhì)量控制,為廣大生物醫(yī)學(xué)科研用戶提供更優(yōu)質(zhì)的服務(wù)!

          細(xì)胞名稱

          人羊膜細(xì)胞WISH                 

          img1

          貨物編碼

          BFN60700188

          產(chǎn)品規(guī)格

          T25培養(yǎng)瓶x1

          1.5ml凍存管x2

          細(xì)胞數(shù)量

          1x10^6

          1x10^6

          保存溫度

          37℃

          -198℃

          運(yùn)輸方式

          常溫保溫運(yùn)輸

          干冰運(yùn)輸

          安全等級(jí)

          1

          用途限制

          僅供科研用途                1類

           

          培養(yǎng)體系

          DMEM高糖培養(yǎng)基(Hyclone)+10%胎牛血清(Gibco)+1%雙抗(Hyclone)

          培養(yǎng)溫度

          37℃

          二氧化碳濃度

          5%

          簡(jiǎn)介

          這株細(xì)胞的起源是正常羊膜,但隨后通過同工酶分析、HeLA標(biāo)記染色體和DNA指紋法分析,它的起源是HeLa細(xì)胞污染的。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽(yáng)性。注意:這株細(xì)胞包含HeLa標(biāo)記染色體,是從HeLa污染細(xì)胞中建株的。經(jīng)過流式驗(yàn)證,細(xì)胞純度98% 。該細(xì)胞引種自ATCC CCL-25

          注釋

          Problematic cell line: Contaminated. Shown to be a HeLa derivative (PubMed=5641128; PubMed=566722; PubMed=1246601; PubMed=6451928; PubMed=20143388). Originally thought to originate from cells of the amniotic sac of Susan Hayflick, the daughter of Leonard Hayflick.

          Part of: Naval Biosciences Laboratory (NBL) collection (transferred to ATCC in 1982).

          Registration: International Cell Line Authentication Committee, Register of Misidentified Cell Lines; ICLAC-00013.

          Transformant: NCBI_TaxID; 333761; Human papillomavirus type 18 (HPV18).

          Omics: Genome sequenced (low read coverage).

          STR信息

                  Amelogenin        X

          CSF1PO        9,10

          D2S1338        17

          D3S1358        15,18

          D5S818        11,12

          D7S820        8,12 (ATCC; CCRID; JCRB; KCLB)

          12 (ECACC)

          D8S1179        12,13

          D13S317        13.3 (ATCC; CCRID; JCRB; KCLB)

          14 (ECACC)

          D16S539        9,10

          D18S51        16

          D19S433        13,14

          D21S11        27,28

          FGA        21

          TH01        7

          TPOX        8,12

          vWA        16,18

          參考文獻(xiàn)

          PubMed=6451928; DOI=10.1126/science.6451928

          Nelson-Rees W.A., Daniels D.W., Flandermeyer R.R.

          Cross-contamination of cells in culture.

          Science 212:446-452(1981)

           

          CLPUB00262

          Gold M.

          A conspiracy of cells. One woman's immortal legacy and the medical scandal it caused.

          (In) ISBN 9780887060991; pp.1-171; State University of New York Press; Albany (1986)

           

          PubMed=20143388; DOI=10.1002/ijc.25242

          Capes-Davis A., Theodosopoulos G., Atkin I., Drexler H.G., Kohara A., MacLeod R.A.F., Masters J.R.W., Nakamura Y., Reid Y.A., Reddel R.R., Freshney R.I.

          Check your cultures! A list of cross-contaminated or misidentified cell lines.

          Int. J. Cancer 127:1-8(2010)

           

          PubMed=23925245; DOI=10.1038/nature12064

          Adey A., Burton J.N., Kitzman J.O., Hiatt J.B., Lewis A.P., Martin B.K., Qiu R., Lee C., Shendure J.

          The haplotype-resolved genome and epigenome of the aneuploid HeLa cancer cell line.

          Nature 500:207-211(2013)

           

           

          1、收到人羊膜細(xì)胞WISH7細(xì)胞,請(qǐng)查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請(qǐng)盡快聯(lián)系。

          2、收到人羊膜細(xì)胞WISH7細(xì)胞,如包裝完好,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過程中的問題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請(qǐng)不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時(shí)左右,讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理。

          3、收到人羊膜細(xì)胞WISH7細(xì)胞后,請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清。剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到 15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到 80%左右 ,血清濃度還是在 10%。

          4、收到人羊膜細(xì)胞WISH細(xì)胞時(shí)如無異常情況 ,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過 80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 3 分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。

          5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于 4℃冰箱,以備不時(shí)之需。

          6、24 小時(shí)后,人羊膜細(xì)胞WISH細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細(xì)胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加 3-5ml(以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn))PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),一般 1-3 分鐘,不超過 5 分鐘??梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁,見細(xì)胞脫落下來,加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細(xì)胞量多可一傳三,有些細(xì)胞不易傳得過稀,有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。(懸浮細(xì)胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。

          7、貼壁細(xì)胞 ,懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無菌操作。換液時(shí),換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。

           

          特別提醒: 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用,請(qǐng)更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。

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