培養(yǎng)細胞的重要環(huán)節(jié)有很多,其中很重要的一步就是為細胞選擇適合的生長環(huán)境,為其選擇成分適合又營養(yǎng)豐富的細胞培養(yǎng)基。細胞培養(yǎng)基是供給細胞營養(yǎng)、維持細胞生長和增殖的多種營養(yǎng)物質(zhì)的混合物,種類一般包括經(jīng)典/基礎培養(yǎng)基、無血清培養(yǎng)基以及化學成分確定的培養(yǎng)基等。那么該如何選擇合適的培養(yǎng)基呢?讓我們一起來看看吧!
1.RPMI-1640培養(yǎng)基
RPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正?;驉盒栽錾陌准毎?,雜交瘤細胞的培養(yǎng),是目前應用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。
2. MEM培養(yǎng)基
也稱zui低必需培養(yǎng)基,它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單,可廣泛適應各種已建成細胞系和不同地方的哺乳動物細胞類型的培養(yǎng)。MEM-Alpha一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細胞類型,而其它沒有特殊之處的細胞株則幾乎均可采用MEM來培養(yǎng)。
3.DMEM-高糖培養(yǎng)基
是一種應用十分廣泛的培養(yǎng)基,可用于許多哺乳動物細胞培養(yǎng),更適合高密度懸浮細胞培養(yǎng)。適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞的培養(yǎng)。
5.DMEM/F12
DMEM/F12培養(yǎng)基適于克隆密度的培養(yǎng)。F12培養(yǎng)基成分復雜,含有多種微量元素,和DMEM以1:1結合,稱為DMEM/F12培養(yǎng)基(DME/F12medium),作為開發(fā)無血清配方的基礎,以利用F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點。該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細胞培養(yǎng)。為了增強該培養(yǎng)基的緩沖能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mM HEPES緩沖液。
6.McCoy’s 5A
McCoy’s 5A Medium主要為肉瘤細胞的培養(yǎng)所設計,可支持多種(如骨髓、皮膚、肺和脾臟等)的原代移植物的生長,除適于一般的原代細胞培養(yǎng)外,主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細胞、人淋巴細胞、HT-29、BHL-100等上皮細胞。
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