目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>試劑盒>>檢測(cè)試劑盒>> YS0221滲透脆性檢測(cè)試劑盒(過篩法)
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更新時(shí)間:2024-10-31 19:04:30瀏覽次數(shù):198評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 2×100ml |
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貨號(hào) | YS0221 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
滲透脆性檢測(cè)試劑盒(過篩法),是參與整個(gè)生物體基本代謝的中間產(chǎn)物之一,可通過三羧酸循環(huán)實(shí)現(xiàn)體內(nèi)糖、脂肪和氨基酸間的互相轉(zhuǎn)化,
丙酮酸在三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝聯(lián)系中起著重要的樞紐作用。丙酮酸是糖無氧代謝的產(chǎn)物,科研工作者常將丙酮酸和乳酸一
起研究,并用二者的比值推算循環(huán)衰竭的程度。丙酮酸檢測(cè)可采用乳酸脫氫酶催化法或二硝基苯肼比色法。
雅吉生物丙酮酸檢測(cè)試劑盒(二硝基苯肼微板法)檢測(cè)原理是在酸性條件下,丙酮酸與二硝基苯肼反應(yīng),
生成丙酮酸-二硝基苯腙復(fù)合物,后者經(jīng)氧化呈棕紅色,通過酶標(biāo)儀測(cè)定520nm處吸光度,據(jù)此通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比可以
計(jì)算出PA水平。該試劑盒可用于檢測(cè)植物、細(xì)胞或組織、血清等樣品中內(nèi)源性的丙酮酸含量,尤其適用植物樣品丙酮酸含量
的檢測(cè)。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
三、自備材料:
1、離心管或小試管
2、蒸餾水
3、酶標(biāo)儀、96孔板
四、操作步驟(僅供參考):
1、配制組織勻漿液(1×)∶取10ml組織勻漿液(3×)加入20ml蒸餾水即成。
2、配制PA Assay Buffer (1x)∶取10ml PA Assay Buffer (1.5×)加入5ml蒸餾水即成。
3、準(zhǔn)備樣品︰
①血清、尿液及其他體液樣品:血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-20°C凍存。
②組織樣品︰稱取1g組織樣品置于勻漿器中,再加入1ml組織勻漿液(1x)仔細(xì)研磨,振搖提取靜置30min ,取上清液4000rpm離心10min ,取上清液,用組織勻漿液(1×)定容至2ml , -20℃凍存,用于PA的檢測(cè)。
③植物材料︰稱取1g植物材料置于勻漿器中,再加入1ml組織勻漿液(1×)仔細(xì)研磨,振搖提取,靜置30min ,取上清液4000rpm離心10min ,取上清液,用組織勻漿液(1×)定容至2ml , -20℃凍存,用于PA的檢測(cè)。
④高濃度樣品:如果樣品中含有較高濃度的PA,可以使用原有的裂解液或PBS等進(jìn)行稀釋,如雞血清可稀釋5~10倍后檢測(cè)。
4、配制標(biāo)準(zhǔn)品工作液︰如果檢測(cè)血清、尿液等樣品,按取丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml):蒸餾水=1:99的比例配制,使?jié)舛冗_(dá)到60μg/ml,如果檢測(cè)組織樣品按丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制,使?jié)舛冗_(dá)到60μg/ml。
注意事項(xiàng):
1、實(shí)驗(yàn)材料應(yīng)盡量新鮮,如取材后不立即使用,應(yīng)存于-20°C.
2、實(shí)驗(yàn)用蒸餾水不能含有二氧化碳,可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水,并蓋緊口。
3、TA滴定液為堿性溶液,有腐蝕性,請(qǐng)小心操作。
4、TA標(biāo)定液容易長(zhǎng)菌,宜4℃保存,一旦發(fā)現(xiàn)有絮狀物請(qǐng)棄用。
5、果實(shí)中含酸量較少時(shí)可將TA滴定液適當(dāng)稀釋后使用,可考慮用0.01~0.05M TA滴定液進(jìn)行滴定。
6、TA滴定液含量計(jì)算公式中,V0最好為3次空白測(cè)定的平均值。
7、如果所測(cè)樣品的濃度過高,應(yīng)用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測(cè)定,并將稀釋倍數(shù)帶入公式。
8、如果樣品顏色較深,滴定終點(diǎn)不易觀察,應(yīng)采用電位滴定法。
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C5027Endonuclease IV
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C5052Ribonuclease R(Rnase R) 核酸外切酶
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