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輔酶Q10(CoQ10)檢測(cè)試劑盒(比色法)是一種生物體內(nèi)廣泛存在的脂溶性醌類化合物，故又稱泛醌，在體內(nèi)呼吸鏈中質(zhì)子移位及電子傳遞中起重要作用，是呼吸鏈中重要的遞氫體，它是細(xì)胞呼吸和細(xì)胞代謝的激活劑，也是重要的抗氧化劑和非特異性免疫增強(qiáng)劑。對(duì)多種酶有激活作用。不同生物體來(lái)源的輔酶Q其側(cè)鏈異戊烯單位的數(shù)目不同，人類和哺乳動(dòng)物是10個(gè)異戊烯單位，故稱輔酶Q10。輔酶Q10是輔酶Q類的重要成員之一，它們與線粒體內(nèi)膜相結(jié)合，廣泛參與體內(nèi)的生物代謝過程。輔酶Q10不僅能給心臟提供動(dòng)力，還具有的抗氧化，清除自由基功能，能預(yù)防血管壁脂質(zhì)過氧化，預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化，并且無(wú)任何毒副作用。具體作用體現(xiàn)在以下四個(gè)方面：

①幫助保護(hù)心臟輔酶Q10有助于為心肌提供充足氧氣，預(yù)防突發(fā)性心臟病，尤其在心肌缺氧過程中輔酶Q10發(fā)揮關(guān)鍵性改善作用。

②保護(hù)皮膚長(zhǎng)期使用輔酶Q10能夠有效防止皮膚衰老，減少臉部皺紋。

③抗疲勞輔酶Q10使細(xì)胞保持良好健康的狀態(tài)，因而機(jī)體充滿活力，精力旺盛，腦力充沛。它是細(xì)胞自身產(chǎn)生的天然抗氧化劑和細(xì)胞代謝啟動(dòng)劑，具有保護(hù)和恢復(fù)生物膜結(jié)構(gòu)的完整性、穩(wěn)定膜電位作用，是機(jī)體的非特異性免疫增強(qiáng)劑，因此顯示出抗疲勞作用。

④防癌抗癌研究表明，輔酶Q10有抗腫瘤作用，臨床對(duì)于晚期轉(zhuǎn)移性癌癥有一定療效。

雅吉生物輔酶Q10(CoQ10)檢測(cè)試劑盒(比色法)其檢測(cè)原理是待測(cè)樣品在堿性條件下，EC取代了CoQ10上的甲氰基，形成藍(lán)色化合物，通過分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀測(cè)定620nm處吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可測(cè)出輔酶Q10的含量。本產(chǎn)品可用于測(cè)定花生、牛肉、沙丁魚、保健品等食品中的CoQ10的含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟(僅供參考)：

自備材料：

1、蒸餾水

2、電子天平、研缽或勻漿器、離心管或試管

3、低溫離心機(jī)、恒溫箱或水浴鍋、酶標(biāo)儀、酶標(biāo)板

操作步驟(僅供參考)：

1、準(zhǔn)備樣品∶

①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉，加入2.5ml PAL Lysis Buffer，冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿，4℃ 10000r/min

離心15~20min，留取上清液，-20℃凍存，用于苯丙氨解氨酶的檢測(cè)。

②血漿、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測(cè)定，-20℃凍存，用于苯丙解氨的檢測(cè)。

③細(xì)胞或組織樣品∶取恰當(dāng)細(xì)胞或組織裂解液，如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿，4℃ 10000r/min離心15~20min，取上清液，

-20℃凍存，用于苯丙酸解氨酶的檢測(cè)。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶，可以使用蒸餾水或PAL

Lysis Buffer稀釋進(jìn)行恰當(dāng)?shù)南♂尅?/span>

2、PAL加樣∶

取96孔板，按照下表設(shè)置對(duì)照孔、測(cè)定孔，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并

注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的PAL活性過高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置2平行孔，

求平均值。

加入物（μl）對(duì)照孔測(cè)定孔

蒸餾水150100

待測(cè)樣本5050

PAL Assay Buffer-50

3、PAL檢測(cè)︰

以對(duì)照孔為對(duì)照(調(diào)零)，酶標(biāo)儀立即測(cè)定290nm處測(cè)定孔的吸光度(記為   A測(cè)定0);40℃準(zhǔn)確孵育1h，立即加入10μl PAL終止

液終止反應(yīng)(備選方案)，以對(duì)照孔為對(duì)照調(diào)零，酶標(biāo)儀立即測(cè)定290nm處測(cè)定孔的吸光度(記為A測(cè)定1)。

注意︰加入PAL終止液終止反應(yīng)為非必須步驟，可37℃準(zhǔn)確孵育1h后直接以對(duì)照孔為對(duì)照調(diào)零，酶標(biāo)儀立即測(cè)定290nm處測(cè)定

孔的吸光度。

注意事項(xiàng)∶

1、待測(cè)樣品中不能含有酶抑制劑，同時(shí)需避免反復(fù)凍融。

2、獲得上清液為PAL酶液，應(yīng)盡快檢測(cè)，亦可-20°℃保存。

3、如果沒有可測(cè)定紫外區(qū)的酶標(biāo)儀和酶標(biāo)板，也可以使用紫外分光光度計(jì)和石英比色皿，但應(yīng)注意比色杯的最小檢測(cè)體積。

4、每次檢測(cè)指標(biāo)不宜過多，否則操作時(shí)間不一，有可能導(dǎo)致樣本間的差異。5、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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