目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>普通PCR檢測試劑盒>> 豬圓環(huán)病毒1型熒光PCR檢測試劑盒
| 純度 | 99% | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 50T | 應用領域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合 |
| 主要用途 | 科研實驗 |
本產(chǎn)品僅供科研，不得做其它用途
更多產(chǎn)品詳細信息可免費向客服索取訂購。
本產(chǎn)品就是根據(jù)PCR原理專門開發(fā)的試劑盒，它具有下列特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品DNA模板。
2. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
3. 產(chǎn)品精心優(yōu)化且特異性高，引物是根據(jù)高度保守區(qū)設計，不會跟除此之外的其它微生物DNA發(fā)生交叉反應。
4. PCR mix中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本產(chǎn)品足夠50次20μL體系的PCR反應。
6. 本產(chǎn)品只能用于定性實驗，不能用于定量。
7. 本產(chǎn)品只能用于科研
豬圓環(huán)病毒1型熒光PCR檢測試劑盒樣品的制備
【試劑盒組成】
序號 | 組成 | 50T/盒 |
1 | RT-PCR反應液 | 875 μL×1管 |
2 | 混合酶液 | 125 μL×1管 |
3 | 陽性對照 | 40 μL×1管 |
4 | C 陰性對照 | 40 μL×1管 |
5 | 說明書 | 1份 |
【儲存條件及有效期】避光-20℃以下保存，避免反復凍融，有效期12個月。
【適用儀器】 ABI7500、羅氏 96/480、安捷倫、伯樂、國產(chǎn)博日、宏石等各種熒光定量 PCR 儀。
【樣本要求】
1.血液或血清樣品：使用無菌注射液抽取樣品置于離心管中待檢。
2.肌肉或內(nèi)臟樣品：取少量樣品（2～3克）于研缽或勻漿器中研磨，然后將研磨勻漿轉(zhuǎn)入無菌離心管中，3000rpm/min 離心10分鐘取上清待檢。
3.應避免標本間交叉污染。
4.標本收集后可立即檢測；若不能立即檢測，可置于2～8℃冷藏過夜保存；如需長期保存，標本應凍存于-80℃以下，避免反復凍融。
使用方法：
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E1-10E6 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。
由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供無傳染性的 DNA 片段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2，1。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，最好用帶芯槍頭，下同。
3. 在 6 號管中加入 5μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 5 號管中加入 5μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 4 號管中加入 5μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E4 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
檢驗方法的局限性】
1.當檢測樣本中被檢核酸濃度低于本試劑盒檢出可能會發(fā)生假陰性的結果。
2.被檢樣本在采集、運輸、儲存以及處理過程中操作方式不當容易造成RNA降解而產(chǎn)生假陰性結果。
3.樣本在采集、運輸、儲存以及處理過程中發(fā)生交叉污染，則容易得到假陽性結果。
【注意事項】
1.使用本試劑盒的實驗室，應嚴格按照國家有關部分頒布的有關基因擴增檢驗實驗室管理規(guī)范進行管理；
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理；
3.各區(qū)域物品均為專用，不得交叉使用，以免污染；檢測結束后，應立即對工作臺清潔；
4.吸取反應液時，應盡量避免產(chǎn)生氣泡；上 PCR 儀前，應注意檢查各反應管是否蓋緊，以免液體蒸發(fā)造成結果不準確；
5.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心；
6.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放；
7.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記；
8.檢測過程中使用過的吸頭，應直接打到盛有 10%次氯酸的廢物缸內(nèi)，檢測結束的PCR 反應管，切忌開蓋，并與其他廢棄物品一同滅菌后丟棄；工作臺及各種實驗用品應定期用 10%次氯酸、75%酒精或紫外燈進行消毒；
9.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用；并在有效期內(nèi)使用。
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