供貨周期 |
現(xiàn)貨 |
規(guī)格 |
500 Tests |
貨號(hào) |
11501 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品品牌:AAT Bioquest
產(chǎn)品貨號(hào):11501
產(chǎn)品名稱:Amplite®熒光過(guò)氧化氫測(cè)定試劑盒*紅色熒光*
英文名稱:Amplite® Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Red Fluorescence*
產(chǎn)品規(guī)格:500 Tests
AATBioquestAmplite熒光過(guò)氧化氫測(cè)定試劑盒
AAT Bioquest11501 Amplite® Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Red Fluorescence* 500Tests
我們北京云肽生物科技有限公司作為AAT Bioquest公司的特約經(jīng)銷商為客戶提供,正規(guī)進(jìn)口,保證原裝正品,貨期穩(wěn)定,折扣好的服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
美國(guó)AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest,Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域,包括吸收(顏色),熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助quan世界的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué),免疫學(xué),細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會(huì)不斷介紹新產(chǎn)品,快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。
AAT Bioquest11501 Amplite® Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Red Fluorescence* 500Tests,產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品品牌:AAT Bioquest
產(chǎn)品貨號(hào):11501
產(chǎn)品名稱:Amplite®熒光過(guò)氧化氫測(cè)定試劑盒*紅色熒光*
英文名稱:Amplite® Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Red Fluorescence*
產(chǎn)品規(guī)格:500 Tests
AATBioquestAmplite熒光過(guò)氧化氫測(cè)定試劑盒
產(chǎn)品說(shuō)明:
激發(fā)(納米) 571 | 發(fā)射(納米) 584 |
過(guò)氧化*(H2O2)是一種活性氧代謝副產(chǎn)物,可作為許多氧化應(yīng)激相關(guān)狀態(tài)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑。它涉及許多與哮喘、動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病血管病變、骨質(zhì)疏松癥、許多神經(jīng)退行性疾病和唐氏綜合癥有關(guān)的生物事件。也許H2O2生物學(xué)最有趣的方面是最近的報(bào)道,即抗體具有將分子氧轉(zhuǎn)化為過(guò)氧化*的能力,有助于免疫系統(tǒng)的正常識(shí)別和破壞過(guò)程。測(cè)量這種反應(yīng)性物質(zhì)將有助于確定氧化應(yīng)激如何調(diào)節(jié)不同的細(xì)胞內(nèi)途徑。Amplite 過(guò)氧化*檢測(cè)試劑盒使用我們的 Amplite®® Red 過(guò)氧化物酶底物來(lái)定量溶液和細(xì)胞提取物中的過(guò)氧化*。它還可用于通過(guò)酶偶聯(lián)反應(yīng)檢測(cè)各種氧化酶活性。該試劑盒是一種優(yōu)化的“混合和讀取"檢測(cè),與 HTS 液體處理儀器兼容。
組件
組分A:安培™紅過(guò)氧化物酶底物 1瓶
組分B:H2O2 1 瓶(3% 穩(wěn)定溶液,200 μL)
組分C:檢測(cè)緩沖液 1 瓶 (100 mL)
組分D:辣根過(guò)氧化物酶 1瓶(20單位)
構(gòu)成部分E:DMSO 1 瓶 (1 mL)
示例協(xié)議
一目了然
協(xié)議摘要
1. 準(zhǔn)備 H2O2工作溶液 (50 μL)
2. 添加 H2O2標(biāo)準(zhǔn)品或測(cè)試樣品 (50 μL)
3. 在室溫下孵育 10 - 30 分鐘
4. 監(jiān)測(cè)Ex/Em = 540/590 nm處的熒光強(qiáng)度
重要說(shuō)明
在開始實(shí)驗(yàn)之前,在室溫下解凍所有試劑盒成分。
重要說(shuō)明
組分A在DTT和β-巰基乙*等硫醇存在下不穩(wěn)定。硫醇高于10 uM(終濃度)會(huì)顯著降低測(cè)定動(dòng)態(tài)范圍。
重要說(shuō)明
NADH和谷胱gan肽(還原形式:GSH)可能會(huì)干擾測(cè)定。
儲(chǔ)備液的制備
除非另有說(shuō)明,否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣,并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1. Amplite Red 過(guò)氧化物酶底物儲(chǔ)備溶液 (100X):
將 250 μL DMSO(組分 E)加入到小瓶的 Amplite™™ Red 底物(組分 A)中。應(yīng)及時(shí)使用此儲(chǔ)備溶液。
2.過(guò)氧化物酶儲(chǔ)備溶液(20 U / mL):
將1 mL測(cè)定緩沖液(組分C)加入辣根過(guò)氧化物酶(組分D)小瓶中。
3. H2O2標(biāo)準(zhǔn)溶液 (20 mM):
加入22.7 μL 的3% H2O2(0.88 M,組分B)放入977μL檢測(cè)緩沖液(組分 C)中。注意:稀釋的H2O2溶液不穩(wěn)定。任何未使用的部分都應(yīng)丟棄。
標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
H2O2 標(biāo)準(zhǔn)
加入 1μL20 mM H2O2將溶液儲(chǔ)備到1999μL測(cè)定緩沖液(組分C)中,以獲得 10μM H2O2標(biāo)準(zhǔn) (HS7)。取10μM H2O2標(biāo)準(zhǔn)并進(jìn)行 1:3 系列稀釋以獲得 H 的連續(xù)稀釋液2O2標(biāo)準(zhǔn)(HS6 - HS1)。
工作溶液的制備
將50μL Amplite™ 紅色過(guò)氧化物酶底物儲(chǔ)備溶液(100X)和200μL 過(guò)氧化物酶儲(chǔ)備溶液(20 U/mL)加入4.75 mL檢測(cè)緩沖液(組分 C)中,使總體積為 5mL。注意:避光保存。
實(shí)驗(yàn)方案樣本
H2O2上清液測(cè)定
1. 準(zhǔn)備 H2O2根據(jù)表96和表1中提供的布局,將標(biāo)準(zhǔn)品(HS)、空白對(duì)照(BL)和測(cè)試樣品(TS)放入純黑色2孔微孔板中。對(duì)于384孔板,每孔使用25μL 試劑而不是50μL。
2. 加入 50 μL H2O2工作溶液進(jìn)入H的每個(gè)孔中2O2標(biāo)準(zhǔn)、空白對(duì)照和測(cè)試樣品,使總H2O2測(cè)定體積為100μL/孔。對(duì)于384孔板,加入25μL H2O2相反,工作溶液的總體積為50μL/孔。
3. 將反應(yīng)在室溫下孵育15至30分鐘,避光。
4. 使用熒光酶標(biāo)儀在激發(fā)= 540±10 nm,發(fā)射= 590±10 nm(最佳Ex / Em = 540/590 nm)監(jiān)測(cè)熒光增加。注意:板的內(nèi)容物也可以轉(zhuǎn)移到白色透明底部微孔板中,并由吸光度酶標(biāo)儀在576±5nm的波長(zhǎng)下讀取。然而,與熒光讀數(shù)相比,吸收檢測(cè)的靈敏度較低。
H2O2細(xì)胞檢測(cè)
Amplite™熒光過(guò)氧化*檢測(cè)試劑盒可用于測(cè)量H的釋放2O2從細(xì)胞。以下是建議的方案,可以修改以滿足特定的研究需求。
1. The H2O2細(xì)胞工作溶液應(yīng)按上述方式制備,但應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中使用的培養(yǎng)基替換檢測(cè)緩沖液(組分C)。建議的培養(yǎng)基包括(a)克雷布斯林格斯磷酸鹽緩沖液(KRPB);(b) 漢克斯平衡yan溶液;或 (c) 無(wú)血清培養(yǎng)基。
2. 在96孔板(50 - 100μL/孔)中制備細(xì)胞,并根據(jù)需要激活細(xì)胞。注意:包括陰性對(duì)照(單獨(dú)培養(yǎng)基和非活化細(xì)胞)用于測(cè)量背景熒光。對(duì)于384孔板,改用25μL/孔的細(xì)胞培養(yǎng)基。
3. 加入50μL H2O2細(xì)胞工作溶液進(jìn)入每個(gè)細(xì)胞孔和H2O2標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于384孔板,加入25μL H2O2將細(xì)胞工作溶液改為放入每個(gè)孔中。
4. 將反應(yīng)在室溫下孵育15至30分鐘,避光。
5. 使用熒光酶標(biāo)儀在激發(fā)= 540±10 nm,發(fā)射= 590±10 nm(最佳Ex /Em = 540/590 nm)監(jiān)測(cè)熒光增加。
AATBioquestAmplite熒光過(guò)氧化氫測(cè)定試劑盒
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品牌 | 貨號(hào) | 產(chǎn)品英文 | 單位 |
AAT Bioquest | 162 | Cyanine 7 maleimide [equivalent to Cy7® maleimide] | 1 mg |
AAT Bioquest | 175 | Cyanine 5.5 maleimide [equivalent to Cy5.5® maleimide] | 1 mg |
AAT Bioquest | 11115 | Amplite® Colorimetric BCA Protein Quantitation Assay Kit | 1000 Tests |
AAT Bioquest | 11116 | Amplite® Colorimetric BCA Protein Quantitation Assay Kit | 5000 Tests |
AAT Bioquest | 11305 | Amplite® Colorimetric Superoxide Dismutase (SOD) Assay Kit | 200 Tests |
AAT Bioquest | 11501 | Amplite® Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Red Fluorescence* | 500 Tests |
AAT Bioquest | 11503 | Cell Meter™ Intracellular Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Green Fluorescence* | 200 Tests |
AAT Bioquest | 11504 | Cell Meter™ Intracellular Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Blue Fluorescence* | 100 Tests |
AAT Bioquest | 11505 | Cell Meter™ Intracellular Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Blue Fluorescence Optimized for Flow Cytometry* | 100 Tests |
AAT Bioquest | 11506 | Cell Meter™ Intracellular Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Green Fluorescence Optimized for Flow Cytometry* | 100 Tests |
AAT Bioquest | 11552 | Amplite® Fluorimetric Peroxidase (HRP) Assay Kit *Red Fluorescence* | 500 Tests |
AAT Bioquest | 11553 | Amplite® Fluorimetric Peroxidase (HRP) Assay Kit *Near Infrared Fluorescence* | 500 Tests |
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