Abmole M4839 CCK8試劑盒500T
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AbMole生物是世界領(lǐng)xian的高品質(zhì)生命科學(xué)產(chǎn)品供應(yīng)商，主營細(xì)胞信號通路的高特異性小分子抑制劑、API、天然產(chǎn)物等生物活性分子，間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞株、wan全培養(yǎng)基，細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)。
Abmole CCK8試劑盒
Abmole M4839 CCK8試劑盒500T，產(chǎn)品簡介：
產(chǎn)品品牌：Abmole
產(chǎn)品貨號：M4839
產(chǎn)品名稱：CCK8試劑盒
英文名稱：Cell Counting Kit-8
產(chǎn)品規(guī)格：500T
產(chǎn)品說明：
>Cell Counting Kit 簡稱CCK 試劑盒，為MTT 法的替代方法，是一種基于WST(水溶性四唑鹽，
化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應(yīng)用于
細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
>WST-8是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些
脫氫酶還原生成橙黃色的formazan (參考圖1)。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，
則顏色越淺。 對于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。
CCK 法與MTT法之間的比較：
細(xì)胞計數(shù)方法 | MTT法 | CCK法 |
形成的formazan的水溶性 | 差 | 好 |
產(chǎn)品性質(zhì) | 粉末 | 溶液 |
使用方法 | 預(yù)先配置 | 無需預(yù)先配置 |
檢測時間 | >4小時 | 1~4小時 |
靈敏度 | 一般 | 靈敏度更高 |
檢測波長 | 560~600nm | 430~490nm |
細(xì)胞毒性 | 高，細(xì)胞形態(tài)wan全消失 | 低，細(xì)胞形態(tài)不變 |
試劑穩(wěn)定性 | 一般 | 好 |
是否需要DMSO溶解 | 需要 | 不需要 |
便捷程度 | 一般 | 非常便捷 |
使用說明：
1、通常在96 孔板中，細(xì)胞增殖實驗和細(xì)胞毒性實驗分別接種細(xì)胞懸液(5000個細(xì)胞和2000個細(xì)胞/100μL/孔，具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小、細(xì)胞增殖速度的快慢等因素決定)。設(shè)置加了相應(yīng)量細(xì)胞培養(yǎng)液、藥物和CCK-8溶液但沒有加入細(xì)胞的孔作為空白對照。
2、細(xì)胞貼壁24小時后，按照實驗需要，進行培養(yǎng)并給予0-10微升特定的藥物刺激。
3、藥物處理2~4天，然后每孔加入10 μL 的CCK 溶液(注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響OD 值的讀數(shù))。
4、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1~4 小時，然后用酶標(biāo)儀測定在450nm 處的吸光度。
5、如果暫時不測定OD 值，打算以后測定的話，可以向每孔中加入10 μL 0.1M 的HCL 溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在24 小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。
6、培養(yǎng)基中酚紅的吸光度可以在計算時，通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不會對檢測造成影響。
注意事項：
1. 由于使用96孔板進行檢測，如果細(xì)胞培養(yǎng)時間較長，一定要注意蒸發(fā)問題。一方面，由于96孔板周圍一圈最容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加相同量的PBS、 水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。
2. 本試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化的反應(yīng)， 所以還原劑(例如一些抗氧化劑)會干擾檢測， 如果待檢測體系中存在較多的還原劑，需設(shè)法去除。
3. 用酶標(biāo)儀檢測前需確保每個孔內(nèi)沒有氣泡，否則會干擾測定。
4. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
活力計算：
細(xì)胞活力*(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[A(0 加藥)-A(空白)] ×100
A(加藥)：具有細(xì)胞、CCK 溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A(空白)：具有培養(yǎng)基和CCK 溶液而沒有細(xì)胞的孔的吸光度
A(0 加藥)：具有細(xì)胞、CCK 溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
*細(xì)胞活力：細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力
保存條件：4oC避光保存一年有效， -20oC避光保存兩年有效。
Abmole CCK8試劑盒
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Abmole M4839 CCK8試劑盒500T
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