Diagenode C01019043-300 Tagmentation Buffer (2x) 300ul
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Diagenode公司2003年成立于比利時,是生產(chǎn)表觀遺傳學產(chǎn)品的公司。表觀遺傳學及二代、三代測序樣本前處理專家,是表觀遺傳學、生物樣本制備和診斷的完整表觀遺傳學解決方案的供應(yīng)商。該公司提供創(chuàng)新的Biorutpor破碎以及IP-star自動化儀器、試劑盒和高品質(zhì)抗體,以簡化DNA甲基化、ChIP以及ChIP-Seq的工作流程。
Diagenode 標記緩沖液
Diagenode C01019043-300 Tagmentation Buffer (2x) 300ul,產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品品牌:Diagenode
產(chǎn)品貨號:C01019043-300
產(chǎn)品名稱:標記緩沖液
產(chǎn)品規(guī)格:300ul
產(chǎn)品說明:
Diagenode標記緩沖液(2x)是進行任何標記反應(yīng)的推薦試劑。它可以與DNA或染色質(zhì)樣品上的Diagenodetagmentase結(jié)合使用,作為總體積反應(yīng)的一半。這是ATAC-seq實驗中使用的試劑。
儲存條件:儲存在-20°C。
預(yù)防 措施:本產(chǎn)品僅供研究使用。不適用于診斷或治療程序。
使用示例 :Diagenode標記緩沖區(qū)(2x)可用于執(zhí)行以下協(xié)議中的標記步驟。
碎裂測定實驗:
l 可以在λDNA上進行片段化測定,使用以下孵育混合物進行1次反應(yīng):
Tagmentation Buffer (2x) | 10 µl |
lambda DNA (50 ng/ µl) | 2 µl |
Tagmentase loaded | 1 µl |
Nuclease-free water | 7 µl |
l 然后將反應(yīng)物在55°C下孵育7分鐘
l 可以通過加入SDS溶液(0.2%最終)在室溫下孵育5分鐘來停止標記
l 然后可以在瓊脂糖凝膠上分析DNA
ATAC-seq實驗:
細胞裂解和細胞核分離后,細胞核沉淀可以與以下混合物一起孵育進行 1 次反應(yīng)
Tagmentation Buffer (2x) | 25 µl |
Tagmentase loaded | 2.5 µl |
Digitonin 1% | 0.5 µl |
Tween20 10% | 0.5 µl |
PBS | 16.5 µl |
Nuclease-free water | 5 µl |
Nuclei pellet* |
|
*每個反應(yīng)的細胞核數(shù)量將取決于ATAC-seq實驗設(shè)計。使用所提出的方案在每個反應(yīng)的50,000個細胞核上成功標記。
l 然后將反應(yīng)物在37°C下孵育30分鐘。
l 然后可以通過從Diagenode MicroChIP透視柱(貨號C03040001)中加入250μlDNA結(jié)合緩沖液來停止標記反應(yīng)。
l 然后可以使用MicroChIP透視柱(貨號C03040001)純化標記文庫,并進行擴增
Diagenode 標記緩沖液
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