供貨周期 |
現(xiàn)貨 |
規(guī)格 |
20次/瓶 |
貨號(hào) |
6013 |
主要用途 |
進(jìn)行TA克隆,克隆PCR產(chǎn)物。 |
TAKARA 6013 pMD19-T載體 pMD19-T Vector Cloning Kit 20次/瓶
TAKARA pMD19-T載體克隆試劑盒-常備現(xiàn)貨
TAKARA 6013 pMD19-T載體 pMD19-T Vector Cloning Kit
我們北京云肽生物科技有限公司作為 TAKARA 公司的特約經(jīng)銷商為客戶提供,正規(guī)進(jìn)口,保證原裝正品,貨期穩(wěn)定的服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
Takara Bio 中國(guó)有兩家公司——寶生物工程(大連)有限公司和寶日醫(yī)生物技術(shù)(北京有限公司。寶生物工程(大連)有限公司是 Takara Bio Inc.在中國(guó)的生產(chǎn)基地,寶日醫(yī)生物技術(shù)(北京)有限公司負(fù)責(zé) Takara Bio Inc.旗下所有品牌在中國(guó)市場(chǎng)的宣傳及銷售。
寶日醫(yī)生物技術(shù)(北京)有限公司成立于 2004 年 1 月,公司主要銷售生物工程研究用試劑和儀器(包括 Takara、Clontech、Cellartis 品牌),產(chǎn)品主要包括PCR/qPCR、基因克隆、基因功能研究、蛋白質(zhì)功能研究、二代測(cè)序、干細(xì)胞研究等產(chǎn)品及服務(wù),并可提供客戶定制化服務(wù)。還開展以細(xì)胞治療為中心的生物工程領(lǐng)域的技術(shù)開發(fā)與服務(wù),銷售細(xì)胞治療和基因治療相關(guān)產(chǎn)品。
TAKARA pMD19-T載體克隆試劑盒-常備現(xiàn)貨
TAKARA 6013 pMD19-T載體 pMD19-T Vector Cloning Kit 20次/瓶
TAKARA 6013 pMD19-T載體 pMD19-T Vector Cloning Kit 20次/瓶,產(chǎn)品說(shuō)明:
制品說(shuō)明
pMD 19-T Vector是一種高效克隆PCR產(chǎn)物 (TA Cloning) 的專用載體。本載體由pUC19載體改建而成,在pUC19載體的多克隆位點(diǎn)處的Xba I 和Sal I 識(shí)別位點(diǎn)之間插入了EcoR V 識(shí)別位點(diǎn),用EcoR V 進(jìn)行酶切反應(yīng)后,再在兩側(cè)的3′端添加 “T" 而成。因大部分耐熱性DNA聚合酶進(jìn)行PCR反應(yīng)時(shí)都有在PCR 產(chǎn)物的3′末端添加一個(gè) “A" 的特性,所以使用本制品可以大大提高PCR產(chǎn)物的連接、克隆效率。
由于本載體以pUC19載體為基礎(chǔ)構(gòu)建而成,所以它具有同pUC19載體相同的功能。此外,本制品中的高效連接液Solution I 可以在短時(shí)間內(nèi) (約30分鐘) 完成連接反應(yīng),其連接液可以直接用于細(xì)菌轉(zhuǎn)化,大大方便了實(shí)驗(yàn)操作。本制品中的Control Insert (500 bp) 還可以用于Control反應(yīng)。
本載體與pMD 18-T Vector 相比,本制品的β-半乳糖苷酶的表達(dá)活性更高,菌落顯示藍(lán)色的時(shí)間縮短,菌落顯示的藍(lán)色更深。因此,克隆后更容易進(jìn)行克隆體的藍(lán)白篩選。
保存:-20℃
純度:Control Insert經(jīng)克隆后的白色菌落中,有90%以上含有Insert DNA片段。
用途
1. 進(jìn)行TA克隆,克隆PCR產(chǎn)物。
2. 對(duì)克隆后的PCR產(chǎn)物使用BcaBEST Sequencing Primers、M13 Primers進(jìn)行DNA測(cè)序。
注意事項(xiàng)
1. Solution I 請(qǐng)于冰中融解。
2. 克隆時(shí)使用的Insert DNA片段 (PCR產(chǎn)物) 建議進(jìn)行切膠回收純化,否則PCR產(chǎn)物中的短片段DNA (甚至是電泳也無(wú)法確認(rèn)的非特異性小片段)、殘存引物等雜質(zhì)都會(huì)影響TA克隆效率。
3. 按照本實(shí)驗(yàn)操作進(jìn)行連接后,直接進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)的連接液不要超過(guò)20 μl。當(dāng)要轉(zhuǎn)化的DNA量較大或準(zhǔn)備進(jìn)行電轉(zhuǎn)化時(shí),需對(duì)連接液進(jìn)行乙醇沉淀,純化DNA后再進(jìn)行轉(zhuǎn)化。進(jìn)行乙醇沉淀時(shí)使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。
4. 連接反應(yīng)請(qǐng)?jiān)?5℃以下進(jìn)行,溫度升高 (>26℃) 較難形成環(huán)狀DNA。連接效率偏低時(shí),可適當(dāng)延長(zhǎng)連接反應(yīng)時(shí)間至數(shù)小時(shí)。
5. 本制品來(lái)源于pUC19載體,因此,適合pUC19載體的感受態(tài)細(xì)胞都可以使用,如:JM109等。
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TAKARA 6013 pMD19-T載體 pMD19-T Vector Cloning Kit 20次/瓶