1 色譜柱規(guī)格
產(chǎn)品名稱 | 理論塔板數(shù) | 基 質(zhì) | 分離模式 | 排阻限 普魯蘭 | 粒徑 (um) | 尺寸I.D.×L (mm) |
SB-802 HQ | 12,000 以上 | 聚羥基甲基丙 烯酸酯 | 尺寸排阻 | 4×103 | 8 | 8.0×300 |
產(chǎn)品名稱 | 最大耐壓(MPa) | 最大使用流量(mL/min) | 使用溫度范圍(℃) | 使用PH 范圍 | 出廠時溶劑 |
SB-802 HQ | 5.0 | 1.2 | 4~70 | 3~10 | 0.02% NaN3 aq. |
通常使用流量:0.5~1.0 mL/min;溶劑置換時流量:<0.5 mL/min
2 使用注意事項
Ⅰ 流動相
SB-802 HQ 是水系凝膠過濾色譜柱,流動相只使用水時,樣品會發(fā)生吸附。為使樣品完
全按照尺寸排阻法來分離,選擇分析樣品最適合的流動相非常關鍵。
1) 非離子性親水性樣品及離子性親水性樣品
一般使用鹽溶液或緩沖液。代表性的鹽及緩沖液如下表。
鹽溶液 | 氯化鈉、硝酸鈉、硫酸鈉、硫酸鉀、硫酸銨 |
緩沖液 | 磷酸緩沖液、鹽酸緩沖液、醋酸緩沖液、檸檬酸緩沖液 |
注意:①流動相的鹽濃度要低于0.5M。(適合0.05~0.5M)
鹽濃度在0.2M 以下時,置換流量0.5mL/min。
鹽濃度在0.2~0.5M 時,置換流量0.3 mL/min。
②流動相PH3~10
③流動相含有氯離子的情況下PH 要大于6。
2) 非離子性疏水性樣品及離子性疏水性樣品
為抑制疏水性樣品的疏水性吸附,流動相中添加極性有機溶劑。
離子性樣品中仍需要加鹽。
置換含有極性有機溶劑的流動相時,流量設定為0.5 mL/min。
3) 蛋白質(zhì)樣品
作為蛋白質(zhì)改性劑的尿素或鹽酸胍水溶液可以用作流動相。對于膜蛋白質(zhì)等通常水溶液中溶解性差的樣品,可以添加SDS 或者Brij-35 等界面活性劑于流動相中。
Ⅱ 注意事項
1) 色譜柱安裝前,使用流動相對流路進行完全置換。
2)色譜柱在高溫下使用,分析結束后首先將泵的流量設為0.5mL/min,關閉色譜柱加熱開關,持續(xù)送液直至色譜柱降至室溫。
在色譜柱冷卻到室溫前從裝置中取出,色譜柱會吸入空氣導致性能降低。
3)流動相使用了含有鹽的水溶液,或者三天以上不使用的情況下,流路及色譜柱要置換成離子交換水。流量要求0.5mL/min 以下。
4)保護柱不僅是除去樣品中的污染物來保護分析柱的,對于泵的脈動或壓力變化也有一定程度的保護作用。因此盡量使用保護柱。
◎如果使用時超過了規(guī)定壓力、規(guī)定流量,致使色譜柱性能降低,這是無法復原的,對此請?zhí)貏e注意。
3 色譜柱性能的測試方法
按照下面的條件,對色譜柱進行性能測試(詳情請參考色譜柱附帶的出廠檢查報告COA)
色譜柱 | 流動相 | 流量 | 色譜柱溫度 | 樣品 | 注入量 |
SB-802 HQ | H2O | 1.0mL/min | 室溫約25℃ | 乙二醇水溶液 | 5μL |
理論塔板數(shù)的計算公式
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