白酒在釀造過程中需經(jīng)歷多種微生物混合發(fā)酵,微生物代謝會(huì)產(chǎn)生各種功能成分,如γ-氨基丁酸和核苷類物質(zhì)等。其中,γ-氨基丁酸具有保護(hù)心血管功能、降低血壓、抗癲癇、鎮(zhèn)痛等作用,是有益于身體健康的氨基酸之一。本篇文章采用了皖儀科技高效液相色譜儀LC3400系列配置紫外檢測(cè)器對(duì)白酒中γ-氨基丁酸含量進(jìn)行檢測(cè)。系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰的理論塔板數(shù)為7000以上。γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)進(jìn)樣5次,保留時(shí)間RSD值為0.1652%,峰面積RSD值為0.2494%,重復(fù)性較好。γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)工作液的線性良好,R值在0.999以上,γ-氨基丁酸檢出限為0.0991 μg/mL,定量限為0.3304 μg/mL。以某品牌白酒作為測(cè)試樣品,未檢測(cè)出γ-氨基丁酸,檢測(cè)結(jié)果正常。說明了該方法配備皖儀科技LC3400系列儀器滿足對(duì)白酒中γ-氨基丁酸含量的檢測(cè)需求。關(guān)鍵詞:γ-氨基丁酸;高效液相色譜法;紫外檢測(cè)器;白酒。
1.2 實(shí)驗(yàn)材料及輔助設(shè)備
稱取6.81g三水合乙酸鈉至1L容量瓶中,用超純水充分溶解混勻,定容至刻度。
稱取0.42g碳酸氫鈉至100mL容量瓶中,用超純水充分溶解混勻,定容至刻度。
稱取0.1g丹磺酰氯至10mL容量瓶中,用乙腈充分溶解混勻,定容至刻度。
1.4.4 γ-氨基丁酸標(biāo)曲實(shí)驗(yàn)工作液精密稱取γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)品適量,用超純水稀釋成混合標(biāo)準(zhǔn)系列,γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度分別為500μg/mL、200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、10μg/mL、5μg/mL、1μg/mL。1.5.1 γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)工作液衍生
測(cè)定前需對(duì)γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液衍生化處理,準(zhǔn)確吸取2mL相應(yīng)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液置于具塞試管中,加入0.4mL的0.05mol/L碳酸氫鈉溶液和0.8mL的10mg/mL丹磺酰氯衍生溶液,混勻后在70℃水浴中反應(yīng)20min,用0.22μm的水系微孔濾膜過濾,上機(jī)檢測(cè)。
測(cè)定前需對(duì)白酒樣品溶液衍生化處理,準(zhǔn)確吸取2mL白酒樣品溶液置于具塞試管中,加入0.4mL的0.05mol/L碳酸氫鈉溶液和0.8mL的10mg/mL丹磺酰氯衍生溶液,混勻后在70℃水浴中反應(yīng)20min,用0.22μm的水系微孔濾膜過濾,上機(jī)檢測(cè)。說明:由上述譜圖可見,γ-氨基丁酸色譜峰的保留時(shí)間為10.017 min,理論塔板數(shù)為7000以上。 說明:本次測(cè)試的γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)工作曲線濃度為500μg/mL、200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、10μg/mL、5μg/mL、1μg/mL。γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍較好,線性相關(guān)系數(shù)>0.999,滿足實(shí)驗(yàn)分析需求。說明:γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(500μg/mL)重復(fù)進(jìn)樣5次,保留時(shí)間RSD值為0.1652%,峰面積RSD值為0.2494%,重復(fù)性較好。說明:以信噪比(S/N)為3確定檢出限(LOD),γ-氨基丁酸檢出限為0.0991 μg/mL。以信噪比(S/N)為10確定定量限(LOQ),γ-氨基丁酸定量限為0.3304 μg/mL。說明:該品牌白酒未檢測(cè)出γ-氨基丁酸,檢測(cè)結(jié)果正常。(1)在制備相關(guān)溶液時(shí)需要注意佩戴好實(shí)驗(yàn)室防護(hù)用品。(3)建議γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)工作液現(xiàn)用現(xiàn)配。(4)衍生過程中,衍生產(chǎn)物對(duì)紫外光照比較敏感,反應(yīng)盡可能在避光條件下進(jìn)行。本篇文章采用了皖儀科技高效液相色譜儀LC3400系列配置紫外檢測(cè)器對(duì)白酒中γ-氨基丁酸含量進(jìn)行檢測(cè)。系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰的理論塔板數(shù)為7000以上。γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)進(jìn)樣5次,保留時(shí)間RSD值為0.1652%,峰面積RSD值為0.2494%,重復(fù)性較好。γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)工作液的線性良好,R值在0.999以上,γ-氨基丁酸檢出限為0.0991 μg/mL,定量限為0.3304 μg/mL。以某品牌白酒作為測(cè)試樣品,未檢測(cè)出γ-氨基丁酸,檢測(cè)結(jié)果正常。說明了該方法配備皖儀科技LC3400系列儀器滿足對(duì)白酒中γ-氨基丁酸含量的檢測(cè)需求。