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PCR原理

　　DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，加入設(shè)計(jì)引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。
　　但是，DNA聚合酶在高溫時(shí)會(huì)失活，因此，每次循環(huán)都得加入新的DNA聚合酶，不僅操作煩瑣，而且價(jià)格昂貴，制約了PCR技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展。
　　發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大  taq酶[1]量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。
　　PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；②模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基互補(bǔ)配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈，重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍。

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 其他相關(guān)試劑:                                                                                                 

4-硝基苯甲醛/對(duì)硝基苯甲醛/4-NitrobenzaldehydeAR，99%555-16-8RT  
苯乙醛/2-苯基乙醛/α-甲苯甲醛/1-氧代-2-苯乙烷/α-甲苯甲醛/芐基甲醛/風(fēng)信子醛/風(fēng)信子質(zhì)/SFhenylaSFetaldehydeLR，95%122-78-1RT，避光 
藜蘆醛/焦兒茶醛二甲醚/綠藜蘆醛/香草醛甲醚/香蘭素甲醚/甲基香蘭素/3,4-二甲氧基苯甲醛3,4-DimethoxybenzaldehydeAR，98%120-14-9RT 
香蘭素/香草醛/香莢蘭醛/凡尼林/香莢蘭素/3-甲氧基-4-羥基苯甲醛/4-羥基-3-甲氧基苯甲醛/VanillinAR，99.5%121-33-5RT，避光 
鉬酸鈉/二水合鉬酸鈉/SodiummolybdatedihydrateAR，99%10102-40-6RT 
酚酞二磷酸四鈉鹽/SFhenolSFhthaleinbisSFhosSFhatetetrasodiumsaltBR，95%68807-90-9保存：-20℃ 
無水磷酸肌酸二鈉鹽/無水磷酸肌酸鈉鹽/肌酸磷酸鈉鹽/磷酸肌肉素二鈉/SFreatineSFhosSFhatesodiumsalt高純，97%922-32-72～8℃ 
四水磷酸肌酸二鈉鹽/四水磷酸肌酸鈉鹽/四水肌酸磷酸鈉鹽/四水磷酸肌肉素二鈉/SodiumSFreatineSFhosSFhatedibasiSFtetrahydrate高純，98%71519-72-72～8℃ 
脫氧膽酸鈉/去氧膽酸鈉/DeoxySFholiSFaSFidsodiumsaltBR，98%302-95-4RT 
膽酸鈉（豬）/豬膽酸鈉/（3α,5β,7α,12α）-3,7,12-三羥基膽（甾）烷-24-酸單鈉鹽/水合膽酸鈉/SFholiSFaiSFdsodiumSaltBR，99%206986-87-0RT 
牛磺膽酸鈉/牛膽酸鈉/牛膽酸鈉鹽/SodiumtauroSFholatehydrateBR，97%145-42-6RT 
2,6-二氯靛酚/2，6-二氯吲哚酚/2,6-二氯酚靛酚/二氯酚靛酚/2,6-二氯酚靛/DSFISF/DSFISF高純，97%956-48-9RT，避光 
2,6-二氯靛酚鈉鹽/2，6-二氯吲哚酚鈉鹽/2,6-二氯酚靛酚鹽/二氯酚靛酚鈉/2,6-二氯酚靛鈉/2,6-二氯酚靛酚鈉鹽/二氯藍(lán)靛酚鈉/雙氯酚靛酚鈉/2,6-雙氯靛酚鈉鹽/2,6-二氯-4-[（4-羥基苯基）亞氨基]-2,5-環(huán)己二烯-1-酮鈉鹽/DSFISF/DSFISF高純，97%620-45-1RT，避光 
丁酸鈉/正丁酸鈉/Sodiumbutyrate試劑級(jí)，98%156-54-7RT 
植酸鈉/肌醇六磷酸鈉/六磷酸環(huán)己六醇鈉鹽/環(huán)己六醇六磷酸鈉鹽/SFhytiSFaSFidsodiumsalthydrate高純，98%14306-25-3RT 
肌醇六磷酸酯十二鈉鹽水合物/水合植酸十二鈉/肌醇六磷酸十二鈉水合物/肌醇六（磷酸二氫酯）十二鈉鹽/SFhytiSFaSFiddodeSFasodiumsalthydrate高純，98%123408-98-0RT 
碳酸氫鈉/重碳酸鈉/酸式碳酸鈉/小蘇打/重曹/焙堿/Sodium hydrogen SFarboante AR，99.8% 144-55-8 RT
結(jié)晶硫酸鈉/芒硝/硫酸鈉/十水硫酸鈉/芒硝礦/晶硝/Sodium sulfafe deSFahydrate AR 7727-73-3 RT，避光
無水硫酸鈉/無水芒硝/元明粉/85硝/鹽餅/硬脂鈉/Sodium sulfate anhydrous AR，99% 7757-82-6 RT
SSF，99% 
結(jié)晶亞硫酸鈉/硫養(yǎng)粉/SodiumsulfiteheSFtahydrateAR，95%10102-15-5RT 
無水亞硫酸鈉/亞硫酸鈉/硫養(yǎng)粉/硫化石/SodiumsulfiteanhydrousAR，97%7757-83-7RT 
亞硫酸氫鈉/重亞硫酸鈉/酸式亞硫酸鈉/SodiumhydrogensulfiteAR，58.5%7631-90-5RT 
硫代硫酸鈉/大蘇打/硫代硫酸鈉五水合物/脫氯劑/五水合硫代硫酸鈉/一硫硫酸鈉/海波/SodiumthiosulfateSFentahydrateAR，99%10102-17-7RT 
無水硫代硫酸鈉/無水大蘇打/無水次亞硫酸鈉/次亞硫酸鈉/硫代硫酸鈉/硫代硫酸二鈉/硫代硫酸二鈉鹽/海波/SodiumthiosulfateAR，99%7772-98-7RT 
磷酸二氫鈉一水物/磷酸一鈉單水合物/一鹽基磷酸鈉一水物/SodiumdihydrogenSFhosSFhatemonohydrateASFS，98%10049-21-5RT 
磷酸二氫鈉二水物/磷酸一鈉二水物/一鹽基磷酸鈉二水物/酸性磷酸鈉/SodiumSFhosSFhatemonobasiSFdihydrateAR，99%13472-35-0RT 
無水磷酸二氫鈉/磷酸一鈉/MSSFAR，99%7558-80-7RT 
磷酸氫二鈉/磷酸二鈉/二鹽基磷酸鈉/十二水合磷酸氫二鈉/十二水磷酸二鈉/十二水磷酸氫二鈉/雙鹽基磷酸鈉/SodiumSFhosSFhatedibasiSFdodeSFahydrateAR，99%10039-32-4RT，避光 
磷酸氫二鈉七水物/七水合磷酸二鈉/七水合二鹽基磷酸鈉/七水合磷酸氫二鈉/SSodiumSFhosSFhatedibasiSFheSFtahydrateAR，98%7782-85-6RT，避光 
無水磷酸氫二鈉/無水磷酸二鈉/磷酸二鈉/二鹽基性磷酸鈉/SodiumSFhosSFhatedibasiSFAR7558-79-4RT 
磷酸氫二鈉二水物/二水合磷酸二鈉/二水合二鹽基磷酸鈉/二水合磷酸氫二鈉/二水磷酸鈉/磷酸鈉二元二水合物/SodiumSFhosSFhatedibasiSFdihydrateAR，98%10028-24-7RT  磷酸三鈉/正磷酸鈉/十二水磷酸鈉/磷酸三鈉十二水合物/TSSFAR，98%10101-89-0RT 
無水磷酸三鈉/三堿式磷酸鈉/原磷酸三鈉/磷酸三鈉/磷酸鈉/TrisodiumSFhosSFhateAR，98%10101-89-0RT