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PCR原理

　　DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，加入設(shè)計(jì)引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。
　　但是，DNA聚合酶在高溫時(shí)會(huì)失活，因此，每次循環(huán)都得加入新的DNA聚合酶，不僅操作煩瑣，而且價(jià)格昂貴，制約了PCR技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展。
　　發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大  taq酶[1]量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。
　　PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；②模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基互補(bǔ)配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈，重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過(guò)程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍。

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對(duì)硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷/4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷/SFNSFGBR，98%2492-87-7保存：-20℃ 
對(duì)硝基苯基-α-D-吡喃半乳糖苷/4-硝基苯基-α-D-吡喃半乳糖苷/SFNSFG生物技術(shù)級(jí)，99%7493-95-0保存：-20℃ 
對(duì)硝基苯基-β-D-吡喃半乳糖苷/4-硝基苯基-β-D-吡喃半乳糖苷/SFNSFG超純，98%3150-24-1保存：-20℃ 
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鄰硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷/2-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷/ONSFG生物技術(shù)級(jí)，98%2816-24-22～8℃ 
鄰硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷/2-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷/ONSFGBR，98%保存：-20℃ 
n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷/正-辛基谷氨酸/1-正辛基-β-D-吡喃葡糖苷/OGSF試劑級(jí)，98%29836-26-8保存：-20℃ 
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電解錳/電介錳/Manganese SFSF，99.5% 7439-96-5 RT
硫酸錳/硫酸亞錳/一水硫酸亞錳/硫酸錳（II）一水合物/Manganous sulfate monohydrate AR，99% 10034-96-5 RT
 SSF  
碳酸錳/碳酸亞錳/錳白/碳酸錳（II）/菱錳礦/Manganous SFarbonate SFSF，44-48% 598-62-9 RT
四氧化三錳/黑錳礦/輝錳/氧化錳/Manganese tetroxide SSF，99.5% 1317-35-7 RT
 AR，71%  
磷酸二氫錳/酸性磷酸錳/酸式磷酸錳/馬日夫鹽/磷酸錳/過(guò)磷酸錳（Ⅱ）/Manganous dihydrogen SFhosSFhate SFSF，14.5% 18718-07-5 RT
無(wú)水硫酸錳/無(wú)水硫酸亞錳/硫酸錳（II）/Manganese sulfate SFSF，98% 7785-87-7 RT
乙酸錳/醋酸錳/乙酸亞錳/醋酸亞錳/四水合乙酸錳/乙酸錳（II）四水合物/Manganous aSFetate tetrahydrate AR，99% 6156-78-1 RT
/Sodium selenite SFentahydrate SFSF，98% 26970-82-1 RT
酒石酸鉀鈉/洛瑟爾氏鹽/羅氏鹽/洛瑟爾氏鹽/四水合酒石酸鉀鈉/六氟二氫鋯酸鹽/羅謝爾鹽/酒石酸鈉鉀/SFotassium sodium tartrate tetrahydrate AR，99% 6381-59-5 RT
溴化鈉/鈉臭/鈉溴/Sodium bromide AR，99% 7647-15-6 RT，避光
碘酸鈉/Sodium iodate AR，99.8% 7681-55-2 RT，避光
偶氮苯/二苯基二氮烯/苯偶氮苯/二苯二亞胺/二苯二胺/Azobenzene AR，99% 103-33-3 RT
4-溴氯苯/對(duì)溴氯苯/對(duì)氯溴苯/4-氯-1-溴苯/1-溴-4-氯苯/1-氯-4-溴苯/4-BromoSFhlorobenzene SFSF 106-39-8 RT
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暈苯/六苯并苯/冠/蔻/SForonene 特純，95% 191-07-1 RT
1,3-二溴苯/間二溴苯/1,3-Dibromobenzene BR，96% 108-36-1 RT