聯(lián)系電話
上海北諾生物科技有限公司
中級會員·14年
- 聯(lián)系人：
- 周經(jīng)理 劉經(jīng)理
- 電話：
- 021-57730393
- 手機(jī)：
- 15800960770
- 傳真：
- 86-021-61496710
- 地址：
- 上海市徐匯區(qū)宜山路520號中華門大廈18樓D座
- 個(gè)性化：
- www.bnbiotech.com
- 網(wǎng)址：
- www.bnbiotech.com
掃一掃訪問手機(jī)商鋪
標(biāo)簽： 限制性內(nèi)切酶 消化 DNA
影響限制性內(nèi)切酶反應(yīng)的因素很多。DNA制品中的污染均能抑制酶切活性。這種抑制可通過增加酶作用單位數(shù)、增大反應(yīng)體枳以稀釋可能的抑制劑或延長反應(yīng)時(shí)間來加以克服。
實(shí)驗(yàn)方法
- 單酶單DNA樣品消化
- 消化多個(gè)DNA
- 部分消化
| 實(shí)驗(yàn)方法原理 | 進(jìn)行限制酶切割反應(yīng)只需簡單地將酶和DNA樣品放在合適的反應(yīng)緩沖液溫育，其中DNA和酶的量、緩沖液的離子強(qiáng)度、溫育溫度和時(shí)間都依具體的反應(yīng)而改變。 |
|---|---|
| 實(shí)驗(yàn)材料 | DNA |
| 試劑、試劑盒 | TE 酶切緩沖液 EDTA |
| 儀器、耗材 | 電泳儀 |
| 實(shí)驗(yàn)步驟 | 1. 混合下列溶液于一個(gè)無菌的微量離心管中
2. 加入限制性內(nèi)切酶（1~5 U/μg DNA）在推薦的溫度溫育1 h （—般是37℃）。
5. 加入5 μl 電泳加樣緩沖液終止反應(yīng)，進(jìn)行瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠電泳。
|
