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原理：細胞接種存活率只表示接種細胞后貼壁的細胞數(shù)，但貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆。而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞。克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。由于細胞生物學(xué)性狀不同，細胞克隆形成率差別也很大，一般初代培養(yǎng)細胞克隆形成率弱，傳代細胞系強；二倍體細胞克隆形成率弱，轉(zhuǎn)化細胞系強；正常細胞克隆形成率弱，腫瘤細胞強。并且克隆形成率與接種密度有一定關(guān)系，做克隆形成率測定時，接種細胞一定要分散成單細胞懸液，直接接種在碟皿中，持續(xù)一周，隨時檢查，到細胞形成克隆時終
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一、原理淋巴細胞在有絲分裂原PHA、ConA等的刺激下，產(chǎn)生增殖反應(yīng)，DNA和RNA合成明顯增加，如在培養(yǎng)液中加入3H－胸腺嘧啶核苷（3H-TdR），則可被轉(zhuǎn)化中的細胞攝入。測定標(biāo)記淋巴細胞的放射強度可反映淋巴細胞增殖的程度。二、儀器和材料RPMI-1640細胞培養(yǎng)液、小牛血清、2-巰基乙醇（2-ME）、青霉素、鏈霉素、刀豆蛋白A（ConA）、Hank's液、PBS緩沖液（pH7.2-7.4）、3H-TdR、閃爍液[2，5-二苯基惡唑（PPO）0.5g、1，4-雙-（5-苯基惡唑基）-苯（POP
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標(biāo)簽：四唑鹽MTT比色MTT法建立于20世紀80年代初，是一種通過測定細胞能量代謝水平用以間接反映細胞增殖情況的檢測方法。它基于兩個假設(shè)：1、只有活細胞能夠?qū)TT還原成為難溶性的藍紫色結(jié)晶物，而死細胞不能達到；2、其吸光度與活細胞數(shù)量成直線正相關(guān)。實驗方法MTT法實驗方法原理活細胞的線粒體中的琥珀脫氫酶能使外源性的MTT還原為難溶性的藍紫色結(jié)晶物并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜能溶解細胞中的紫色結(jié)晶物，用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值，可間接反映細胞數(shù)量。在一定細胞
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根據(jù)細胞生長的恃點，傳代方法有3種：懸浮生長細胞傳代、半懸浮生長細胞傳代（Hela細胞）、貼壁生長細胞傳代。實驗方法細胞培養(yǎng)技術(shù)消化法實驗方法原理培養(yǎng)細胞傳代根據(jù)不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代；懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打傳代。實驗材料細胞試劑、試劑盒D-Hanks液小牛血清RPMI1640雙抗胰蛋白酶EDTANHClNaHCO3儀器、耗材凈化工作臺離心機恒溫水浴箱冰箱倒置相差顯微鏡培養(yǎng)箱
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實驗方法細胞培養(yǎng)技術(shù)實驗方法原理選用Wistar大鼠經(jīng)消化酶灌注肝臟后,用分離液分離HSC，通過觀察其自發(fā)熒光及其顯著特征性結(jié)構(gòu)的脂肪染色、細胞免疫化學(xué)染色等方法鑒定。實驗材料雄性SD大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM酶消化液I、ⅡNycodenzD-Hanks’液HBSS臺盼蘭儀器、耗材手術(shù)器械尼龍網(wǎng)相差顯微鏡熒光顯微鏡實驗步驟一、實驗步驟1.大鼠腹腔麻醉后在超凈臺上剖腹，進行門靜脈插管。2.以D-Hanks’液灌注，同時剪開下腔靜脈，沖掉血液后，改灌以100ml酶消化液I(0.05%
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細胞技術(shù)專題：大鼠星型膠質(zhì)細胞培養(yǎng)實驗
標(biāo)簽：大鼠星型膠質(zhì)大鼠星型膠質(zhì)細胞培養(yǎng)可以：（1）用于神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、分化及再生等基礎(chǔ)研究；（2）腦缺血預(yù)處理上調(diào)神經(jīng)保護蛋白的機制研究；（3）腦損傷和腦疼痛的研究；（4）新蛋白的功能研究。實驗方法酶消化法胰酶消化法胰蛋白酶消化法實驗方法原理大鼠星形膠質(zhì)細胞原代培養(yǎng)后，作膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)免疫細胞化學(xué)染色鑒定，應(yīng)用缺氧D-Hank液及缺氧培養(yǎng)罐行OGD后用臺盼藍染色及乳酸脫氫酶(LDH)漏出率檢測細胞損傷程度。實驗材料Wistar大鼠乳鼠試劑、試劑盒FBSDMEM胰蛋白酶EDTA酒精儀器 -
細胞技術(shù)專題：神經(jīng)膠質(zhì)細胞培養(yǎng)實驗
標(biāo)簽：神經(jīng)膠質(zhì)神經(jīng)膠質(zhì)細胞培養(yǎng)可以：（1）獲得神經(jīng)膠質(zhì)細胞；（2）用于神經(jīng)膠質(zhì)細胞電生理特性，如膜電位、去極化等；（3）用于免疫應(yīng)答研究。實驗方法酶消化法胰蛋白酶消化法實驗方法原理神經(jīng)細胞（神經(jīng)元）不易培養(yǎng)，只有在適宜情況下，如接種在膠原底層上，或加入神經(jīng)生長因子和膠質(zhì)細胞因子時，可出現(xiàn)一定程度的分化，長出突起等現(xiàn)象，但很難使之增值。而神經(jīng)膠質(zhì)細胞是神經(jīng)組織中比較容易培養(yǎng)的成分。實驗材料大鼠試劑、試劑盒MEMFBS胰酶EDTAD-Hanks’液儀器、耗材眼科剪滴管離心機培養(yǎng)皿CO2培養(yǎng)箱實驗步驟 -
細胞技術(shù)專題：大鼠大腦皮層神經(jīng)元細胞培養(yǎng)實驗
標(biāo)簽：大鼠大腦皮層神經(jīng)元大鼠大腦皮層神經(jīng)元細胞培養(yǎng)可以：（1）獲得大鼠大腦皮層神經(jīng)元細胞；（2）用于神經(jīng)元細胞定向分化研究；（3）用于神經(jīng)元細胞凋亡研究。實驗方法機械性劃割培養(yǎng)酶消化法實驗方法原理SD胎鼠腦皮層神經(jīng)元體外培養(yǎng)7d，微量移液器塑料滴頭于培養(yǎng)孔內(nèi)機械性劃割培養(yǎng)之神經(jīng)元，依劃割程度不同分為輕、中、重3組，對照組除不進行機械性劃割，其余處理同損傷組，傷后不同時間點（10，30min，1，3，6，12，24h）檢測細胞存活率及培養(yǎng)液上清乳酸脫氫酶(LDH)含量。實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒
