詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
胱天蛋白酶9(CASP9)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D255 |
產(chǎn)品名稱:胱天蛋白酶9(CASP9)重組蛋白小鼠
英文名稱:Recombinant Caspase 9 (CASP9)
APAF3; ICE-LAP6; MCH6; Apoptosis-Related Cysteine Peptidase; Cysteinyl Aspartate Specific Proteinases 9; Apoptotic protease-activating factor 3; ICE-like apoptotic protease 6
型號:GOY-01D255
信號轉(zhuǎn)導
酶與激酶
細胞凋亡
腫瘤免疫
感染免疫
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::n/a
預測分子量:23.1kDa
實際分子量:29kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Met1~His200 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液,(pH8.0,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01%skl, 5% Trehalose and Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:6.1
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關產(chǎn)品:
英文名稱:Recombinant Quiescin Q6 Sulfhydryl Oxidase 1 (QSOX1) 產(chǎn)品名稱:靜止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L5 (UCHL5) 產(chǎn)品名稱:泛素羧基端酯酶L5(UCHL5)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
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英文名稱:Recombinant Platelet Activating Factor Acetylhydrolase Ib3 (PAFAH1B3) 產(chǎn)品名稱:血小板激活因子乙酰水解酶Ⅰb3(PAFAH1B3)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:Recombinant Protein Interacting With C Kinase 1 (PICK1) 產(chǎn)品名稱:蛋白激酶C相互作用蛋白1(PICK1)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:Recombinant Protein Kinase C Zeta (PKCz) 產(chǎn)品名稱:蛋白激酶Cζ(PKCz)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
γ-連環(huán)素/連接蛋白γ抗體 γ-Catenin
第12號染色體開放閱讀框23抗體 C12orf23
10號染色體開放閱讀框4抗體 C10orf4
10號染色體開放閱讀框47抗體 C10orf47
10號染色體開放閱讀框81抗體 C10orf81
19號染色體開放閱讀框47抗體 C19orf47
19號染色體開放閱讀框54抗體 C19orf54
N-乙酰半乳糖胺糖蛋白3、β-半乳糖轉(zhuǎn)移酶1抗體 C1GALT1
19號染色體開放閱讀框21抗體 C19orf21
19號染色體開放閱讀框24抗體 C19orf24
19號染色體開放閱讀框18抗體 C19orf18
Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體 Collagen alpha-1(II) chain
胱天蛋白酶9(CASP9)重組蛋白小鼠黑曲霉 Aspergillus niger大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢腺細胞系蛋白銀染試劑盒
肺形側(cè)耳(鳳尾菇) Pleurotus pulmonariusNCI-H716(人結(jié)直腸腺細胞)
T-47D(人腺管細胞)GC-1, 鼠原細胞
純白鏈霉菌粉白變種 Streptomyces candidus var. alboroseus泡盛曲霉 Aspergillus awamori
香菇 Lentinula edodes根瘤菌 Rhizobium sp.
P388D1(小鼠淋巴樣瘤細胞)人肝動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基
瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus小鼠骨髓瘤淋巴細胞
COLO 201(人結(jié)直腸腺細胞)MGC80-3(人胃細胞)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae小鼠肺大靜脈平滑肌細胞培養(yǎng)基
小鼠小梁網(wǎng)細胞培養(yǎng)基少根根霉 Rhizopus arrhizus
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti猴菌
小鼠淋巴瘤細胞豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna