詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
三叉神經(jīng) | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細胞樣 | YS-01X8422 |
細胞簡介:
兔三叉神經(jīng)元分離自三叉神經(jīng)組織;三叉神經(jīng)為粗大的混合性腦神經(jīng),含一般軀體感覺和特殊內臟運動兩種纖維。其特殊內臟運動纖維起于腦橋中段的三叉神經(jīng)運動核,纖維組成三叉神經(jīng)運動根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦,位于感覺根下內側,后進入三叉神經(jīng)第3支下頜神經(jīng)中,經(jīng)卵圓孔出顱,隨下頜神經(jīng)分支分布于咀嚼肌等。運動根內還含有三叉神經(jīng)中腦核有關的纖維,主要傳導咀嚼肌的本體感覺。三叉神經(jīng)內以軀體感覺神經(jīng)纖維為主,這些纖維的細胞體位于三叉神經(jīng)節(jié)(半月節(jié))內,該神經(jīng)節(jié)位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉神經(jīng)壓跡處,為硬腦膜形成的美克爾腔包裹。三叉神經(jīng)節(jié)由假單極神經(jīng)元組成,其中樞突集中構成了粗大的三叉神經(jīng)感覺根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處入腦,止于三叉神經(jīng)諸感覺核,其中傳導痛溫覺的纖維主要終止于三叉神經(jīng)脊束核;傳導觸覺的纖維主要終止于三叉神經(jīng)腦橋核。三叉神經(jīng)節(jié)細胞的周圍突組成三叉神經(jīng)三大分支,即第1支眼神經(jīng)、第2支上頜神經(jīng)、第3支為下頜神經(jīng)。從3大分支不斷分支分布于面部皮膚、眼及眶內、口腔、鼻腔、鼻旁竇的粘膜、牙、腦膜等,傳導痛、溫、觸等多種感覺。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的兔三叉神經(jīng)元采用消化法結合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔三叉神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):神經(jīng)元細胞樣
傳代特性:屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔三叉神經(jīng)元體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
溴化乙錠 1g
EthidiumBromide(EB) 1ml(10mg/ml)
乙二醇 500ml
Ethyleneglycol
PE標記人CD80單克隆抗體
HLA Class II DR4抗體
CHODL重組小鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 Protein
Smad同源物7(Smad7)重組蛋白 Recombinant Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7 (Smad7)
CNPY2重組人 CNPY2 蛋白 Protein
CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽)
NOV Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白
Bcl2樣蛋白11(BCL2L11)重組蛋白 Recombinant Bcl2 Like Protein 11 (BCL2L11)
CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽)
HPGD重組小鼠 HPGD / 15-PGDH 蛋白 Protein
IL6ST Protein Rat 重組大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 蛋白
TMED1重組人 TMED1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
小鼠乙型肝e抗體(HBeAb)ELISA pcr檢測試劑盒
Human soluble cluster of differeiation 38 (sCD38) ELISA Kit 人可溶性白細胞分化抗原38(sCD38)試劑盒
HumanHelicobacterpyloriIgM,Hp-IgMELISAKit 人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitfor5-(Human5-Nucleotidase)ELISAKit人5核苷酸酶
飲料阿斯巴塘(aspaame)含量薄層色譜法定性試劑盒20次
MouseMacrophageInflammatoryProtein3α,MIP-3αELISAKit小鼠巨噬細胞性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔三叉神經(jīng)元細胞大鼠肺表面活性物質相關蛋白D(SP-D)試劑盒 ,英文名: SP-D ELISA Kit
Porcine keratinocyte growth factor (KGF) ELISA Kit 豬角化細胞生長因子(KGF)試劑盒
轉基因植物cry1A基因核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMA/Melan-A(HumanMelanomaMarkerA)ELISAKit人黑色素瘤標記物
體液氧化應激活性氧(ROS)高質熒光測定試劑盒50次
ELISAKitPP裸鼠蛋酸酶