詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
卵巢 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8390 |
細胞簡介:
兔卵泡膜分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側發(fā)育(右側已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構,而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結締組織構成;髓質位于中央,由疏松結締組織構成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。哺乳動物的卵巢內卵泡的發(fā)育需要相關激素的調節(jié)才能完成,垂體素(卵泡刺激素和黃體生成素)使原始卵泡開始發(fā)育,其過程中還產(chǎn)生大量的雌激素。雌激素是卵巢的顆粒細胞和卵泡膜細胞在垂體素的作用下協(xié)同合成的,卵泡膜細胞合成的雄激素透過基膜進入顆粒細胞,并轉變?yōu)榇萍に?。因此,卵泡膜細胞在生殖內分泌調節(jié)中占有關鍵的位置,了解其在病理及生理中的作用,對于與性激素有關的婦產(chǎn)科疾?。ㄈ缍嗄衣殉簿C合癥、卵巢癌等)的研究有著重要意義。在哺乳動物卵泡生長發(fā)育的過程中,卵母細胞由不斷增加的顆粒細胞層包裹。卵巢組織中的膜細胞作為卵泡的外層細胞可以維持卵泡結構的完整性,參與構成卵母細胞和顆粒細胞發(fā)育的微環(huán)境且為類固醇激素的生成提供底物。在哺乳動物中調節(jié)膜細胞類固醇激素生成的機制已見相關報道,但是有關卵泡膜細胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。
方法簡介:
實驗室分離的兔卵泡膜采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔卵泡膜經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以內狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔卵泡膜體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠氧化型試劑盒 小鼠氧化型試劑盒 小鼠氧化型試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠氧化型試劑盒、小鼠氧化型試劑盒
小鼠試劑盒試劑盒 小鼠試劑盒 小鼠試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠試劑盒、小鼠試劑盒試劑盒
小鼠試劑盒 小鼠試劑盒 小鼠試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠試劑盒、小鼠試劑盒
小鼠活化素試劑盒 小鼠活化素試劑盒 小鼠活化素試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠活化素試劑盒、小鼠活化素試劑盒
DNA修復蛋白GIYD2抗體
低密度脂蛋白受體相關蛋白5+6抗體
MFI2重組小鼠 MFI2 / CD228 / melanotransferrin 蛋白 Protein
半乳糖凝集素3(GAL3)重組蛋白 Recombinant Galectin 3 (GAL3)
IL11重組人 IL11 / Interleukin 11 / IL-11 蛋白 Protein
CD44 Protein Human 重組人 CD44 蛋白
SIRPG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 (Fc 標簽)
AMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1 0.5mgAMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1) 腺苷單0酸活化蛋白激酶β1抗原
CD44 Protein Human 重組人 CD44 蛋白
FOLR1重組小鼠 FOLR1 / FR-alpha 蛋白 Protein
LILRA5 Protein Rat 重組大鼠 LILRA5 蛋白
FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His 標簽) Protein
小鼠血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA pcr檢測試劑盒
Human cryoglobulin (CG) ELISA Kit 人冷球蛋白(CG)試劑盒
Humanmethoexate,MTXELISAKit 人喋呤(MTX)pcr檢測試劑盒分裝
BombyxmoriLivetin,LT試劑盒家蠶卵黃蛋白(LT)試劑盒規(guī)格:96T/48T
A含量比色法定量試劑盒20次
MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISAKit小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔卵泡膜細胞大鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP1)試劑盒 ,英文名: MCP1 ELISA Kit
Podocin ELISA Kit 人Podocin 試劑盒
Ratiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit 大鼠細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforcTn-I(RabbitcardiacoponinI)ELISAKit兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ
細胞糖類總量鐵比色法定量試劑盒20次
Ratepidermalgrowthfactorreceptor,EGFRELISAKit大鼠表皮生長因子受體(EGFR)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行