詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
鼻黏膜 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X8319 |
細(xì)胞簡介:
兔鼻黏膜上皮分離自鼻黏膜組織;黏膜是覆蓋在機(jī)體內(nèi)消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu),由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。根據(jù)部位不同,有口腔黏膜、胃腸黏膜、鼻腔黏膜、氣管黏膜、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結(jié)構(gòu)也因功能、部位不一而不盡相同。鼻腔黏膜,簡稱鼻黏膜,覆蓋于鼻腔表面,黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。根據(jù)結(jié)構(gòu)與功能的不同,鼻黏膜又分為前庭部、呼吸部和嗅部三部分。前庭部是鄰近外鼻孔的部分,有豐富的鼻毛可以阻擋空氣中較大的塵粒吸入。呼吸部占鼻黏膜的大部,有發(fā)達(dá)的上皮纖毛,它們可向咽部擺動(dòng),黏著有塵粒、細(xì)菌的黏液排向咽部,終將它們排出體外。此外,此部分有豐富的血管與腺體,對(duì)吸入的空氣有加溫和濕潤作用。嗅部黏膜范圍較小,主要位于鼻腔頂部。它含有一種專司嗅覺的嗅細(xì)胞及嗅腺,它們分泌能溶解到達(dá)嗅區(qū)的含氣味的微粒,刺激嗅細(xì)胞表面上的嗅毛產(chǎn)生嗅覺,而且還由于嗅細(xì)胞具有不同的受體,可分別接受不同化學(xué)分子的刺激,因此可產(chǎn)生不同的嗅覺。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔鼻黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔鼻黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔鼻黏膜上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)僀
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
無形體核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
東方體核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
人皰疹病毒6型(HHV-6)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
(OC43/HKU1)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA 試劑盒
Human fetal hemoglobin (HBF) ELISA Kit 人胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒
HumanHerpessimplexvirus2,HSV-Ag2ELISAKit 人單皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanarylhydrocarboeceptor,AhR試劑盒人芳香烴受體(AhR)試劑盒
植物源性食品芥末(mustard)試劑盒20次
Humahymosinα1ELISAKit人肽α1(Thymosinα1)試劑盒
PE標(biāo)記小鼠CD62L單克隆抗體
微絲相關(guān)蛋白3樣抗體
GREM1重組小鼠 Gremlin 1 / GREM1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
蛋白酶激活受體4(PAR4)重組蛋白 Recombinant Protease Activated Receptor 4 (PAR4)
CFL1重組人 CFL1 / N-cofilin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FETUB Protein Human 重組人 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TNFRSF10D Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 蛋白 (His 標(biāo)簽)
A Beta1-40 (mutation type, MT 0.1mgA Beta1-40 (mutation type, MT) peptide 突變型β淀粉樣肽1-40
FETUB Protein Human 重組人 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD83重組小鼠 CD83 / HB15 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
IFNG Protein Rat 重組大鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白
ABHD14B重組人 ABHD14B 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
兔鼻黏膜上皮細(xì)胞大鼠β細(xì)胞素(BTC)試劑盒 ,英文名: BTC ELISA Kit
Mouse esadiol receptor (ER) ELISA Kit 小鼠雌二醇受體(ER)試劑盒
ELISA 小鼠核轉(zhuǎn)錄因子p65(mouse NF-kBp65) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-15ELISAKIT大鼠白介素15
通用型馬萊姆癥嗜吞噬細(xì)胞無形體(LymeandAnaplasmaPhagocytophilum)試劑盒20次
ELISAKitANG-R-Tie1大鼠血管生成素受體Tie1
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行