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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腹腔液 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 巨噬細(xì)胞樣 | YS-01X7058 |
細(xì)胞簡介：
兔腹腔巨噬分離自腹腔；腹腔，即軀干腹部的腔，內(nèi)襯腹膜，由體壁、橫膈膜和盆底圍成，其內(nèi)容納胃、肝、膽囊、脾臟、胰、腎臟、腸、闌尾、膀胱、泌尿系和婦科(子宮、附件)等其他內(nèi)臟器官。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細(xì)胞，而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞，在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞，令其對病原體作出反應(yīng)。巨噬細(xì)胞功能及其在疾病發(fā)生過程中的作用是目前研究的熱點(diǎn)問題之一；腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔腹腔巨噬采用反復(fù)往腹腔注射培養(yǎng)基并抽取的方法結(jié)合差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔腹腔巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 （12mM）
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒 96T/48T
小鼠肌酸激酶(CK)試劑盒 96T/48T
小鼠肌肉生長抑制素/肌抑素（MSTN）試劑盒 96T/48T
小鼠肌球蛋白(Myosin)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat alternative macrophage activation associated chemical factor 1 (AmAC-1) ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)試劑盒
Humanai-matedciullinatedvimeinaibody,MCVELISAKit 人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAlanineAminoansferase,ALT/GPT試劑盒人轉(zhuǎn)氨酶/谷轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物O-糖基糖蛋白化試劑盒5次
Mouse8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)試劑盒規(guī)格：96T/48T
INO80D蛋白抗體
基質(zhì)金屬蛋白酶20抗體
IFNGR1重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG; 0.5mgMAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;) 髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b(抗原)
FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標(biāo)簽) Protein
DCXR Protein Human 重組人 DCXR / HCR2 蛋白
ART4 Protein Mouse 重組小鼠 Art4 / CD297 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG; 0.5mgMAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;) 髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b(抗原)
DCXR Protein Human 重組人 DCXR / HCR2 蛋白
IFNGR1重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
ART4 Protein Mouse 重組小鼠 Art4 / CD297 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標(biāo)簽) Protein
兔腹腔巨噬細(xì)胞大鼠腦多巴胺神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)試劑盒 ，英文名： CDNF ELISA Kit
Mouse oxidized low density lipoprotein aibody (OLAb) ELISA Kit 小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)試劑盒
Ratproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGHRP(MouseGrowthHormoneReleasingPeptide)ELISAKit小鼠生長激素釋放多肽
細(xì)胞鈣蛋白酶(CALPAIN)活性熒光定量試劑盒20次
Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRβELISAKit大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
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