詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
睪丸 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7879 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔睪丸間質(zhì)分離自睪丸組織;睪丸間質(zhì)細(xì)胞成群分布在曲精小管之間,胞體呈圓形,橢圓形或不規(guī)則形,胞體較大,直徑約20μm,胞質(zhì)呈嗜酸性,細(xì)胞核呈圓形或卵圓形,常位于中央,染色較淡,有1-2個(gè)核仁線(xiàn)粒體多,呈管嵴狀,無(wú)分泌顆粒。從青春期開(kāi)始,睪丸間質(zhì)細(xì)胞受垂體前葉嗜堿性細(xì)胞分泌的間質(zhì)細(xì)胞刺激素(黃體生成素)的作用,能合成分泌雄性激素,可促進(jìn)的發(fā)生和男性生殖器官發(fā)育,以及維持性征和性功能。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔睪丸間質(zhì)采用膠原酶消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的兔睪丸間質(zhì)經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以?xún)?nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素 -18 (mouse IL-18) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) Biosource
小鼠白細(xì)胞抑制因子 (mouse LIF) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) R&D
小鼠淋巴細(xì)胞趨化因子 (mouse Lymphotactin) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白 -1 (mouse MCP-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender
小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai cardiolipin aibody IgA (ACA-IgA) ELISA Kit 人抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)試劑盒
Humandopachrometaomerase,DTELISAKit 人多巴色素異構(gòu)酶(DT)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforACA(Mouseai-cenolandcenosomeaibody)ELISAKit小鼠抗中性粒/中心體抗體
一步法膠回收試劑盒20次
MouseorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit小鼠孤腓肽(OFQ/N)試劑盒規(guī)格:96T/48T
LIMD2蛋白抗體
鉀離子通道Kir2.1抗體
EFNB1重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 Protein
APP695-770 (Amyloid protein precursor 0.5mgAPP695-770 (Amyloid protein precursor) 淀粉樣肽前體蛋白(多肽抗原)
MS4A1重組人 CD20 / MS4A1 蛋白 (aa 213-297, His 標(biāo)簽) Protein
ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標(biāo)簽)
CNTN3 Protein Rat 重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白
白介素1α(IL1α)重組蛋白 Recombinant Interleukin 1 Alpha (IL1a)
ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標(biāo)簽)
SMPD1重組小鼠 SMPD1 / ASM 蛋白 Protein
IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CPNE1重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 Protein
兔睪丸間質(zhì)細(xì)胞大鼠免疫球蛋白樣EGF樣域酪酸激酶1(Tie1)試劑盒 ,英文名: Tie1 ELISA Kit
Mouse insulin receptor beta (ISR- beta) ELISA Kit 小鼠胰島素受體β(ISR-β)試劑盒
RatCytochrome-C,Cyt-CELISAKit 大鼠(Cyt-C)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGFAP(Humanglialfibrillaryacidicprotein)ELISAKit人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白
細(xì)胞甘油激酶(Glycerolkinase)活性酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次
RatSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。