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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱：兔冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
組織來(lái)源：冠狀動(dòng)脈
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔冠狀動(dòng)脈平滑肌體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔冠狀動(dòng)脈平滑肌分離自冠狀動(dòng)脈組織；冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈，起于主動(dòng)脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型：右優(yōu)勢(shì)型、均衡型、左優(yōu)勢(shì)型。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的對(duì)分支。左冠狀動(dòng)脈為一短干，發(fā)自左主動(dòng)脈竇，經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過(guò)心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合。它是構(gòu)成冠狀動(dòng)脈壁的主要細(xì)胞成分，細(xì)胞膜上分布著多種離子通道，如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道；它們參與了靜息電位的維持與細(xì)胞膜電位的復(fù)極化、超極化，調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能，此外動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖、炎癥及凋亡等。因此，原代分離培養(yǎng)的冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，對(duì)研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機(jī)制具有非常重要的作用。冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔冠狀動(dòng)脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔冠狀動(dòng)脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理？
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠癌胚抗原試劑盒 小鼠癌胚抗原試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠癌胚抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠癌胚抗原試劑盒、小鼠癌胚抗原試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
超氧化物歧化酶測(cè)試劑盒 超氧化物歧化酶測(cè)試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 超氧化物歧化酶測(cè)試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：超氧化物歧化酶測(cè)試劑盒、超氧化物歧化酶測(cè)試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
紅細(xì)胞膜蛋白試劑盒 紅細(xì)胞膜蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 紅細(xì)胞膜蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：紅細(xì)胞膜蛋白試劑盒、紅細(xì)胞膜蛋白試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠16α羥基雌試劑盒 小鼠16α羥基雌試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠16α羥基雌試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠16α羥基雌試劑盒、小鼠16α羥基雌試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai cardiolipin aibody IgM (ACA-IgM) ELISA Kit 人抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)試劑盒
HumanE3/ubiquitin-proteinligase,E3/UBPLELISAKit 人泛素連接酶(E3/UBPL)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforACA(Humanadrenalcoexaibody)ELISAKit人腎上腺皮質(zhì)抗體
一步法熒光定量PCR反應(yīng)液20次
MouseomeinELISAKit小鼠網(wǎng)膜素(omein)試劑盒規(guī)格：96T/48T
p53調(diào)節(jié)凋亡誘導(dǎo)蛋白1抗體
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白25抗體
EDA2R重組大鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 Protein
GATA-3(GATA binding factor 3 0.5mgGATA-3(GATA binding factor 3) GATA結(jié)合蛋白3抗原
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ERP27 Protein Human 重組人 ERP27 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
MMP8 Protein Mouse 重組小鼠 MMP-8 / CLG1 蛋白
GATA-3(GATA binding factor 3 0.5mgGATA-3(GATA binding factor 3) GATA結(jié)合蛋白3抗原
ERP27 Protein Human 重組人 ERP27 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
EDA2R重組大鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 Protein
MMP8 Protein Mouse 重組小鼠 MMP-8 / CLG1 蛋白
CD300A重組人 CD300A / CMRF-35H / IGSF12 蛋白 Protein
兔冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞大鼠卵0脂脂酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)試劑盒 ，英文名： LCAT ELISA Kit
Mouse insulin like growth factor binding protein 3 (IGFBP-3) ELISA Kit 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)試劑盒
Rat50%complemehemolysis,CH50ELISAKit 大鼠血清總補(bǔ)體(CH50)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGDNFELISAKit大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子
細(xì)胞高密度脂蛋白(HDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次
RatSerumamyloidA,SAAELISAKit大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
化工儀器網(wǎng)