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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
前列腺 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X8186 |
細(xì)胞簡介：
兔前列腺上皮分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成對的實(shí)質(zhì)性器宮，由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問題時(shí)，排尿首先受影響。前列腺是機(jī)體非常少有的，具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構(gòu)成精液主要成分；作為內(nèi)分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。前列腺上皮細(xì)胞與前列腺的功能關(guān)系密切，上皮細(xì)胞的損傷是前列腺炎的主要病癥，重度的前列腺炎患者的前列腺液內(nèi)可檢測到脫落的上皮細(xì)胞，這是上皮細(xì)胞損傷的標(biāo)志。炎癥發(fā)生時(shí)，與炎癥相關(guān)的一些炎癥因子可能發(fā)生變化。因此，體外培養(yǎng)前列腺上皮細(xì)胞是研究前列腺炎及前列腺上皮肉瘤等疾病的前提和基礎(chǔ)。前列腺主要特征如下：①前列腺結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)均受雄性激素的調(diào)控；②基底細(xì)胞主要表達(dá)高分子量細(xì)胞角蛋白（CK-5、CK-14），基底上皮細(xì)胞可分化成管腔上皮細(xì)胞；③前列腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)為研究前列腺的許多重要特性以及化學(xué)和激素性致癌作用提供了機(jī)會(huì)。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔前列腺上皮采用先消化、后膠原酶-聯(lián)合消化并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔前列腺上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔前列腺上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
酸性品紅（復(fù)紅） 5g
FuchsinAcid 25g
G-418抗菌素 1g
G-418Sulfate 5g
豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFβ3)試劑盒 ，英文名： TGFβ3 ELISA Kit
Human pulmonary surfacta associated protein D (SP-D) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)試劑盒
rabbithepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit 兔子肝細(xì)胞生長因子(HGF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBDNF(HumanBrainderivedneuroophicfacor)ELISAKit人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子
細(xì)菌總巰基含量比色法定量試劑盒20次
Rabbitcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISAKit兔環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
苯丙羥化酶4單克隆抗體
錨定蛋白G抗體
APCS重組大鼠 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 Protein
HCV-NS1 丙型肝病毒-NS1(抗原 0.5mgHCV-NS1 丙型肝病毒-NS1(抗原)
PRSS3重組人 Trypsin-3 / PRSS3 蛋白 Protein
IFNW1 Protein Human 重組人 IFN omega 1 / IFNW1 蛋白
CD33 Protein Mouse 重組小鼠 CD33 / Siglec-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HCV-NS1 丙型肝病毒-NS1(抗原 0.5mgHCV-NS1 丙型肝病毒-NS1(抗原)
IFNW1 Protein Human 重組人 IFN omega 1 / IFNW1 蛋白
APCS重組大鼠 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 Protein
CD33 Protein Mouse 重組小鼠 CD33 / Siglec-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PRSS3重組人 Trypsin-3 / PRSS3 蛋白 Protein
兔前列腺上皮細(xì)胞大鼠巨噬細(xì)胞性蛋白相關(guān)蛋白1(MRP1)試劑盒 ，英文名： MRP1 ELISA Kit
Monkey platelet factor 4 (PF-4/CXCL4) ELISA Kit血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒
Ratlymphotactin,Lptn/LTNELISAKit 大鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforfractalkine/CX3CL1ELISAKit大鼠趨化因子
細(xì)胞活力臺盼藍(lán)染色試劑盒100次
RatPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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