詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
血液組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X7196 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔外周血白分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱(chēng)為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類(lèi)開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。白細(xì)胞是一類(lèi)無(wú)色、球形、有核的血細(xì)胞。白細(xì)胞不是一個(gè)均一的細(xì)胞群,根據(jù)其形態(tài)、功能和來(lái)源部位可以分為三大類(lèi):粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,其中粒細(xì)胞又可根據(jù)胞質(zhì)中顆粒的染色性質(zhì)不同,分為中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞三種。根據(jù)白細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有無(wú)特殊顆粒,可將其分為有粒白細(xì)胞和無(wú)粒白細(xì)胞。前者常簡(jiǎn)稱(chēng)為粒細(xì)胞,根據(jù)其特殊顆粒的染色特性,又分為中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞,白細(xì)胞也通常被稱(chēng)為免疫細(xì)胞。在顯微鏡下可以看到,血細(xì)胞中體積比較大、數(shù)量比較少,具有細(xì)胞核;其主要作用是吞噬細(xì)菌、防御疾病。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血白采用取外周血、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái)制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血白經(jīng)過(guò)檢測(cè),且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠狀腺原酸(T3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠17羥孕(17-OHP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠結(jié)合蛋白(RBP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit A(IgA)試劑盒
HumanAquaporin2,AQP-2ELISAKit 人水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Elisa偽狂犬病毒gE2.0抗體診斷試劑盒5*96孔5*96孔
真菌/酵母a-(a-AMYLASE)活性EPS-G7酶偶聯(lián)比色法定量試劑盒20次
MouseC-telopeptideoftypeⅠcollagen,CTX-ⅠELISAKit小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
AF680標(biāo)記的核因子κB抑制蛋白E抗體
缺氧誘導(dǎo)基因1C蛋白抗體
HAVCR2重組食蟹猴 TIM3 / HAVCR2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II 0.5mgIGF-II( Insulin-like Growth Factor-II ) 胰島素樣生長(zhǎng)因子-II(抗原)
MMP8重組人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein
CMPK1 Protein Human 重組人 CMPK1 蛋白
PRL Protein Mouse 重組小鼠 PRL / Prolactin 蛋白
IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II 0.5mgIGF-II( Insulin-like Growth Factor-II ) 胰島素樣生長(zhǎng)因子-II(抗原)
CMPK1 Protein Human 重組人 CMPK1 蛋白
HAVCR2重組食蟹猴 TIM3 / HAVCR2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
PRL Protein Mouse 重組小鼠 PRL / Prolactin 蛋白
MMP8重組人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein
兔外周血白細(xì)胞大鼠甲狀旁腺素受體2(PTHR2)試劑盒 ,英文名: PTHR2 ELISA Kit
Mouse tumor necrosis factor soluble receptor I (TNFsR- I) ELISA Kit 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)試劑盒
Ratcarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit 大鼠酶2(CA-2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforFEP(HumanFreeerythrocyteproloporphyrin)ELISAKit人游離原卟啉
細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)活性熒光定量試劑盒20次
Ratnuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISAKit大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行