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用于純種細(xì)菌的增菌及觀察細(xì)菌在液體環(huán)境中的生長(zhǎng)特征(混濁生長(zhǎng),表面生長(zhǎng)或沉淀生長(zhǎng))(1)材料肉湯培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)物(大腸埃希菌、化膿性鏈球菌、枯草芽胞桿菌)(2)方法①取接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌、冷卻。②以“雙管移植法”左手持細(xì)菌斜面培養(yǎng)物和肉湯培養(yǎng)基兩支試管,右手持接種環(huán),按無(wú)菌操作法取少量細(xì)菌,將沾菌的接種環(huán)在斜傾的接近液面的管壁上輕輕涂抹研勻,試管直立使沾附在管壁上的細(xì)菌沒(méi)入液體中,接種后放37℃恒溫箱中培養(yǎng)。(3)結(jié)果①渾濁生長(zhǎng)大腸埃希菌菌液呈均勻混濁,管底有少量沉淀。②沉淀生長(zhǎng)化膿性鏈球菌
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實(shí)驗(yàn)原理所謂大腸菌群,是指在37℃培養(yǎng)24h內(nèi)能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣的兼性厭氧的革藍(lán)氏陰性無(wú)芽孢桿菌的總稱。主要由腸桿菌科中四個(gè)屬內(nèi)的細(xì)菌組成,即埃希氏桿菌屬、檸檬酸桿菌屬、克雷伯氏菌屬和腸桿菌屬。水的大腸菌群數(shù)是指100mL水檢樣內(nèi)含有的大腸菌群實(shí)際數(shù)值,以大腸菌群zui近似數(shù)(MPN)表示。在正常情況下,腸道中主要有大腸菌群、糞鏈球菌和厭氧芽孢桿菌等多種細(xì)菌。這些細(xì)菌都可以隨人畜排泄物進(jìn)入水源,由于大腸菌群在腸道內(nèi)數(shù)量多,所以,水源中大腸菌群的數(shù)量,是直接反映水源被人畜排泄物污染的一項(xiàng)重要指標(biāo)
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實(shí)驗(yàn)試劑BacteriumpreparationCryoprotectiveagentTrueCoolTMcryovial實(shí)驗(yàn)設(shè)備CoolBoxTMCFT30ice-freecoolingstationCoolRack®CFT30CoolRack®CFCryolabelsand/orcryomarkersThermalTrayHPplatform(optional)CoolSinkTMBX50(optional)37°Cwaterbath-80°CFreezer實(shí)驗(yàn)步驟1.BacteriaPre
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用于保存菌種及間接檢查細(xì)菌有無(wú)動(dòng)力。(1)材料半固體培養(yǎng)基。細(xì)菌斜面培養(yǎng)物。(2)方法①將接種針經(jīng)火焰滅菌冷卻后,從斜面培養(yǎng)物表面沾取細(xì)菌。②用無(wú)菌法穿刺接種,將接種針刺入半固體培養(yǎng)基正中央,深度達(dá)距管底0.5cm處停止,然后循原路退出。注意在刺入及拔出時(shí)要保持接種針不向穿刺線外擺動(dòng)。③試管口通過(guò)火焰滅菌,塞上棉塞。接種針經(jīng)火焰滅菌。培養(yǎng)物放37℃恒溫箱中培養(yǎng)。(3)結(jié)果:有動(dòng)力的細(xì)菌呈擴(kuò)散生長(zhǎng),無(wú)動(dòng)力的細(xì)菌沿穿刺線生長(zhǎng)。
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(1)材料瓊脂斜面培養(yǎng)基經(jīng)分離培養(yǎng)的平板培養(yǎng)物。(2)方法①在瓊脂斜面培養(yǎng)基試管上部標(biāo)明移種的菌名(或編號(hào))、接種日期、接種者的組別及代號(hào)。②左手持長(zhǎng)有細(xì)菌的平板底,右手持接種環(huán)。接種環(huán)在火焰上滅菌冷卻后,沾取平板劃線上發(fā)育良好的孤立菌落。把平板放回原處,立即用此手取斜面培養(yǎng)基斜持,用右手小指與手掌夾持棉塞,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)后撥出棉塞,管口通過(guò)火焰滅菌。③將已沾菌的接種環(huán)伸入斜面培養(yǎng)基的管底部的凝固水,沿斜面培養(yǎng)基的表面從底向上劃一直線,然后再?gòu)牡撞肯蛏蟿澾B續(xù)曲折線;也可不劃直線只劃曲折線。取出接種環(huán),
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【感受態(tài)細(xì)胞的制備】 一步法制備感受態(tài)細(xì)胞
一、操作步驟:1.涂平板:為取得*的感受態(tài)效率,必須先把甘油菌或其它形式保存的菌種涂LB平板,并培養(yǎng)過(guò)夜。2.接種:取一有新鮮培養(yǎng)的菌種的LB平板,后續(xù)操作均在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。把鑷子的頂端在70%酒精中蘸一下,并在酒精燈上略略燒一下,使鑷子的頂端處于無(wú)菌狀態(tài)。用鑷子夾取一個(gè)無(wú)菌的塑料槍頭或牙簽,從平板上挑取一個(gè)單克隆,然后把蘸有菌種的塑料槍頭或牙簽放到裝有3毫升LB的細(xì)菌培養(yǎng)試管內(nèi)。上述操作也可以使用接種環(huán)等進(jìn)行操作。3.培養(yǎng):37℃約200rpm培養(yǎng)過(guò)夜,通常培養(yǎng)時(shí)間控制在16小時(shí)左右為宜。不宜 -
感受態(tài)細(xì)胞的制備】 感受態(tài)細(xì)胞的制備及溶液配制
1.挑取適當(dāng)菌株的E.coli單菌落接種于2mlSOB培養(yǎng)液中,37℃搖床過(guò)夜。2.取0.5-1ml過(guò)夜培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)種到50mlSOB中,18℃劇烈震蕩,直到A600達(dá)到0.6。3.將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到50ml離心管中,4℃4,000rpm/min離心10min。同時(shí)在冰浴上配置TB溶液。4.棄上清,將離心管倒置于濾紙上,使培養(yǎng)液被吸干。5.取1ml剛配的TB溶液打散菌體沉淀,再加入15mlTB(1/3體積的起始培養(yǎng)液),冰浴10-15min,4℃4,000rpm/min離心10min。6.棄上清,沉 -
【感受態(tài)細(xì)胞的制備】 如何選擇進(jìn)口高壓滅菌器
進(jìn)口高壓滅菌器因其使用的安全性和自動(dòng)化程序高,深受實(shí)驗(yàn)室用戶的喜愛(ài)。那么,怎么才能買到稱心如意的產(chǎn)品呢?怎樣區(qū)分哪些產(chǎn)品是*?哪些是國(guó)內(nèi)組裝產(chǎn)品呢?下面將告訴您如何選擇進(jìn)口高壓滅菌器:在選購(gòu)進(jìn)口高壓滅菌器之前,首先需要了解,進(jìn)口高壓滅菌器,尤其是50升以上的進(jìn)口高壓滅菌器,在中國(guó)屬于特種設(shè)備,在使用前,用戶需要向當(dāng)?shù)氐奶胤N設(shè)備檢查機(jī)構(gòu)(或是鍋檢所,或是技術(shù)監(jiān)督局,按各地的實(shí)際情況)辦理使用許可證。在申請(qǐng)辦理使用許可證時(shí),需要提交的證書(shū)包括:一、《進(jìn)口壓力容器生產(chǎn)許可證》,簡(jiǎn)稱壓力容器許可證。這個(gè)